[发明专利]一种全新基因组合模式在小鼠中建立胰腺癌的方法

权利要求书

1.一种非人哺乳动物的胰腺癌动物模型的制备方法，其特征在于，所述方法包括步骤：提供一非人哺乳动物，向所述非人哺乳动物中引入KRAS突变，并且敲降所述非人哺乳动物体内的Tp53、Cdkn2a和Smad4的表达。

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述方法包括步骤：

(a)获得一慢病毒，所述慢病毒中含有过表达KRAS突变体和敲降Tp53、Cdkn2a和Smad4表达的核苷酸序列；

(b)用所述慢病毒感染非人哺乳动物胰腺头部。

3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述非人哺乳动物为成年的小鼠。

4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤(a)中，所述的慢病毒中包括一外源核酸构建物，所述的核酸构建物包括以下元件：

(i)KRAS突变型基因序列及其启动子I；

(ii)靶向Tp53基因的shRNA序列及其启动子II；

(iii)靶向Cdkn2a基因的shRNA序列及其启动子III；和

(iv)靶向Smad4基因的shRNA序列及其启动子IV。

5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述的核酸构建物中具有从5’端到3’端如下所示的结构：H1-shTp53-CMV-KRAS^G12D-U6-shCdkn2a-U6-shSmad4。

6.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的胰腺癌是胰腺导管腺癌。

7.一种如权利要求1所述方法制备的非人哺乳动物模型的用途，其特征在于，该模型被用作研究人胰腺癌的动物模型。

8.一种如权利要求1所述方法制备的非人哺乳动物模型的用途，其特征在于，该模型被用于筛选或鉴定可减轻或治疗人胰腺癌的物质(或治疗剂)。

9.一种用如权利要求1所述的方法制备的非人哺乳动物模型。

10.一种筛选或鉴定治疗或缓解胰腺癌的潜在治疗剂的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(a)将候选物质施用于如权利要求所述方法制备的非人哺乳动物模型；和

(b)对所述动物模型的表型或症状进行分析，并与对照组进行比较；

其中，与对照相比，如果施用了候选物质的动物模型中表征胰腺癌的症状得到改善，则表明该候选物质是人胰腺癌的潜在治疗剂。