[发明专利]一种用于检测MTRR基因和MTR基因多态性的引物组合、试剂盒以及检测方法

权利要求书

1.一种用于检测MTRR基因和MTR基因多态性的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含引物组合，以及，探针组合；

所述引物组合分为野生型检测体系和突变型检测体系：

所述野生型检测体系包括：

MTRR 66 A上游引物、MTR 2756 A上游引物、MTRR 66 下游引物、MTR 2756 下游引物、内参上游引物和内参下游引物；

所述突变型检测体系包括：

MTRR 66 G上游引物、MTR 2756 G上游引物、MTRR 66 下游引物、MTR 2756 下游引物、内参上游引物和内参下游引物；

MTRR 66 A上游引物：5’-GCCATCGCAGAAGAACTA-3’，

MTRR 66 G上游引物：5’-GCCATCGCAGAAGAACTG-3’，

MTR 2756 A上游引物：5’-AATATGAAGATATTAGACACGA-3’，

MTR 2756 G上游引物：5’-AATATGAAGATATTAGACACGG-3’，

MTRR 66 下游引物：5’-CACTGTAACGGCTCTAACC-3’，

MTR 2756 下游引物：5’-TGTGGGCATCATCGTA-3’，

内参上游引物：5’-GCCCCCGGTTTCTATAAATTG-3’，

内参下游引物：5’-CTGGCGACGCAAAAGAAGAT-3’；

所述探针组合包括如下探针：

MTRR 66 探针：5’-AACGGCTCTAACCTTATCGG-3’，

MTR 2756 探针：5’-TCACCCAGTGAAGCCCACG-3’，

内参探针：5’-TCTCTGCTCCTCCTGTTCGACAGTCAGC-3’，

每条探针的5’端为荧光基团，3’端为淬灭基团；

所述荧光基团为荧光基团FAM、VIC、ROX、HEX或Cy5；

所述淬灭基团为BHQ或MGB。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，包括如下两个PCR体系：

野生型PCR反应体系，包括：

MTRR 66 A上游引物150~200nM、MTR 2756 A上游引物 150~200nM、MTRR 66 下游引物150~200nM、MTR 2756 下游引物150~200nM、MTRR 66探针 150~200nM、MTR 2756 探针150~200nM、内参上游引物 150~200nM、内参下游引物 150~200nM、内参探针 150~200nM、1×PCR缓冲液、150~250μM dNTPs、MgCl₂ 300~500μM、Taq酶和UNG酶；

突变型PCR反应体系，包括：

MTRR 66 G上游引物150~200nM、MTR 2756 G上游引物 150~200nM、MTRR 66 下游引物150~200nM、MTR 2756 下游引物150~200nM、MTRR 66探针 150~200nM、MTR 2756 探针150~200nM、内参上游引物 150~200nM、内参下游引物 150~200nM、内参探针 150~200nM、1×PCR缓冲液、150~250μM dNTPs、MgCl₂ 300~500μM、Taq酶和UNG酶。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，还包括：

突变型对照品和野生型对照品。