[发明专利]铁皮石斛叶生物碱的制备方法及其应用

说明书

本发明提供铁皮石斛叶生物碱的制备方法与其在铁皮石斛叶的质量控制中的应用。本发明的制备方法包括将铁皮石斛叶经乙醇提取的粗提物，通过石油醚、乙酸乙酯、二氯甲烷、正丁醇萃取，然后将二氯甲烷萃取部位经硅胶、凝胶柱层析，以及高效液相色谱制备，得到川芎哚、β‑咔啉、1‑羟甲基‑β‑咔啉、1‑(β‑咔啉‑1‑基)‑3,4,5‑三羟基‑1‑戊酮和4‑(6‑甲基吡嗪‑2‑基)‑1,2,3‑丁三醇。本发明填补了铁皮石斛叶生物碱研究方面的空白，本发明的方法首次从铁皮石斛叶中分离、鉴定出咔啉类生物碱和吡嗪类生物碱。方法简单实用，操作性强，溶剂使用环保。并可以利用这五个生物碱作为标准品，评判铁皮石斛叶质量。

技术领域：

本发明属于医药和食品技术领域，尤其涉及铁皮石斛叶生物碱成分的制备与其在铁皮石斛叶质量控制中的应用。

背景技术：

据2020版《中华人民共和国药典》记载，兰科植物铁皮石斛Dendrobiumofficinale Kimura et Migo的干燥茎，具有益胃生津、滋阴清热的功能；用于治疗热病津伤、口干烦渴、胃阴不足、食少干呕、病后虚热不退、阴虚火旺、骨蒸劳热、目暗不明、筋骨痿软等病症。铁皮石斛叶，则被作为地方特色食品在利用，如浙江省卫生健康委员会于2020年6月11日发布了浙江省食品安全地方标准《干制铁皮石斛叶》(DB33/3012-2020)(https://mp.weixin.qq.com/s/-qzRMnAjPF4t1j6Nocuaxg)；贵州省卫生健康委员会于2020年7月17日发布了《铁皮石斛叶(干叶)》食品安全地方标准(http://www.gzhfpc.gov.cn/xwzx_500663/zwyw/202007/t20200724_61712723.html)。

铁皮石斛叶主要含有多糖、黄酮、联苄、甾体等类型化学成分[文献1,张春花；徐巧林；曾雷；王颂；罗青文；陈颖乐.铁皮石斛叶的化学成分研究.林业与环境科学,2020,36(3),30-34.文献2,唐靖雯；卢礼平；王欢；梁斌；潘梅.铁皮石斛叶的研究进展.中国民族民间医药,2020,29(7),63-67.文献3,任刚；陈优婷；叶金宝；钟国跃；肖川云；邓文赞；陈云龙.铁皮石斛叶的化学成分研究.中草药,2020,51(14),3637-3644.文献4,Ren,G.；Deng,W.-Z.；Xie,Y.-F.；Wu,C.-H.；Li,W.-Y.；Xiao,C.-Y.；Chen,Y.-L.Bibenzyl derivatives fromleaves of Dendrobium officinale.Natural Product Communications,2020,15(2),1-5]。

到目前为止，尚没有系统地研究铁皮石斛叶生物碱类成分的报道，这对于铁皮石斛叶的质量控制，以及提升铁皮石斛叶质量标准来说，是一个缺陷。

发明内容：

针对铁皮石斛叶研究上存在的空白，发明人系统地研究了铁皮石斛叶中的生物碱类成分，首次从铁皮石斛叶中分离、鉴定出咔啉类生物碱和吡嗪类生物碱。本发明旨在提供铁皮石斛叶生物碱的制备方法及其在铁皮石斛叶质量控制中的应用。

为了实现本发明的上述目的，本发明提供了如下的技术方案：