[发明专利]一种核酸保存液及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种核酸保存液及其制备方法和应用，属于生物制品技术领域。本发明公开的核酸保存液所用原料的成本较低，组分数量较少，制备方式简便、快速，在更准确控制添加物用量的同时降低了生产成本；该核酸保存液在0‑50℃运输条件下样本核酸可稳定保存15天，不影响后续样本DNA/RNA提取与检测实验，保存效果好；该核酸保存液在0‑50℃运输条件下可稳定保存2年，不影响后续样本DNA/RNA提取与检测实验，保存时间长。

技术领域

本发明涉及生物制品技术领域，更具体的说是涉及一种核酸保存液及其制备方法和应用。

背景技术

核酸是由许多核苷酸合成的生物大分子化合物，广泛存在于所有动植物细胞、微生物体内，生物体内的核酸根据化学组成不同，可分为核糖核酸(DNA)和脱氧核糖核酸(RNA)。

准确的检测核酸是分子生物学样品分析的一个重要方面，核酸检测的高成本和高专业性使得样本的获得和检测通常相分离，需要检测的样本大多需要经过短途或者长途的运输才能进入到检测流程。但作为生物遗传信息携带者，核酸的性能不稳定，在外界物理因素如温度、湿度、紫外线等；化学因素如PH值、水解反应、氧化反应等；生物因素如酶解和微生物侵染等容易造成核酸的降解变性，这就需要对样本的运输时间做严格限制，大大增加了运输过程中样品保存的困难度。

目前，保存样品的方式主要为样品采集后直接低温保存，这种方法有较大的局限性，一是低温保存成本较高，需要特殊设备如液氮罐等。二是将样本置于超低温长期保存，容易使核酸的状态和结构发生改变，导致检测结果不准确。基于此，有必要开发一种在运输条件下能够为样品提供稳定环境，防止细胞破裂，核酸降解的保存液，以消除对后续检验检测的不利影响。

因此，提供一种核酸保存液及其制备方法和应用是本领域技术人员亟需解决的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种核酸保存液及其制备方法和应用，该核酸保存液具有在常温运输条件下保持核酸稳定性的优点。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种核酸保存液，按重量百分比计，由以下成分组成：柠檬酸13％-35％，吐温200.50％-2.50％，EDTA二钠13％-40％，硫酸钠35％-70％，聚乙二醇辛基苯基醚0.50％-2.50％，余量为DEPC水。

进一步，一种核酸保存液，按重量百分比计，由以下成分组成：柠檬酸21％，吐温201.50％，EDTA二钠35.9％，硫酸钠40％，聚乙二醇辛基苯基醚1.50％，余量为DEPC水。

进一步，所述核酸保存液的pH为4.5-6。

进一步，一种核酸保存液的制备方法，具体步骤如下：

(1)按比重称量柠檬酸、吐温20、EDTA二钠、硫酸钠、聚乙二醇辛基苯基醚，溶于DEPC水；

(2)将溶解的溶液用pH计调节pH至4.5-6；

(3)将调节pH后的溶液过0.22μM水系滤膜除菌，得核酸保存液。

进一步，一种核酸保存液的制备方法，还包括步骤(4)将所配制的核酸保存液无菌无酶分装至取样管，0-50℃用于短期存储、测试；如果长期储存存放于4℃。

进一步，所述的核酸保存液在保存和运输生物样本中的应用，保存和运输温度为0-50℃。

进一步，保存和运输温度为25℃。

进一步，所述生物样本为人和除人以外的哺乳动物的血液，尿液，粪便，痰液，唾液及咽喉拭子采集液。

进一步，所述的核酸保存液在保存和运输生物样本中的应用，用于保存冠状病毒核酸。

若试剂偏酸性，用NaOH调pH；若偏碱性，则用浓HCl调pH。