[发明专利]一种用于检测乙脑病毒和盖塔病毒的核酸组及检测方法在审
| 申请号: | 202010331697.6 | 申请日: | 2020-04-24 |
| 公开(公告)号: | CN111363854A | 公开(公告)日: | 2020-07-03 |
| 发明(设计)人: | 王静林;孟锦昕;李楠;何于雯;徐天刚 | 申请(专利权)人: | 云南省畜牧兽医科学院;中国动物卫生与流行病学中心 |
| 主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司: | 成都四慧知识产权代理事务所(普通合伙) 51307 | 代理人: | 杨志廷 |
| 地址: | 650224*** | 国省代码: | 云南;53 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 用于 检测 乙脑 病毒 核酸 方法 | ||
1.一种用于检测乙脑病毒和盖塔病毒的核酸组,其特征在于,其包括用于检测乙脑病毒基因的第一引物对以及用于检测盖塔病毒的第二引物对;
所述第一引物对包括:SEQ ID NO.1所示的上游引物和SEQ ID NO.2所示的下游引物;
所述第二引物对包括:SEQ ID NO.4所示的上游引物和SEQ ID NO.5所示的下游引物。
2.根据权利要求1所述的核酸组,其特征在于,所述核酸组还包括碱基序列如SEQ IDNO.3所示的荧光探针,以及碱基序列如SEQ ID NO.6所示的荧光探针。
3.根据权利要求2所述的核酸组,其特征在于,所述荧光探针一端标记有荧光基团,另一端标记有淬灭基团。
4.根据权利要求3所述的核酸组,其特征在于,所述荧光基团选自FAM、HEX、VIC、TET、CY5、CY3、Texas Red、JOE或TFAM。
5.根据权利要求4所述的核酸组,其特征在于,所述淬灭基团选自TAMRA、Dabcyl、Eclipse、MGB、BHQ1或BHQ2。
6.一种检测乙脑病毒和盖塔病毒的方法,其特征在于,其包括:使用权利要求1-5任一项所述的核酸组对提取自待检样品的DNA待测样品进行PCR扩增。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,在PCR扩增的反应体系中,第一引物对中的上游引物浓度为:5-100pmol/ml,第一引物对中的下游引物浓度为:5-100pmol/ml,第二引物对中的上游引物浓度为:5-100pmol/ml,第二引物对中的下游引物浓度为:5-100pmol/ml。
8.根据权利要求权利要求7所述的方法,其特征在于,在PCR扩增的反应体系中,第一引物对中的上游引物浓度为:10-30pmol/ml,第一引物对中的下游引物浓度为:10-30pmol/ml,第二引物对中的上游引物浓度为:10-30pmol/ml,第二引物对中的下游引物浓度为:10-30pmol/ml。
9.根据权利要求权利要求6所述的方法,其特征在于,PCR扩增的反应体系含有如SEQID NO.3所示的荧光探针以及如SEQ ID NO.6所示的荧光探针,所述荧光探针的浓度为:5-100pmol/ml。
10.根据权利要求9所述的方法,其特征在于,所述荧光探针的浓度为:10-30pmol/ml。
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