[发明专利]一种利用组合生物合成技术制备地贝卡星的方法

权利要求书

1.一种利用组合生物合成技术制备地贝卡星的方法，其特征在于：通过基因操作将3’,4’羟基双脱氧基因在产生卡那霉素B的链霉菌中进行内源性表达或外源性的加入3’,4’羟基双脱氧基因组成的双脱氧酶系，使卡那霉素B的3’,4’位脱羟基生成地贝卡星；所述的3’,4’羟基双脱氧基因为genP、genB3、genB4的组合，所述的genP、genB3、genB4的核苷酸序列如SEQ ID NO.1-3所示。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的genP、genB3、genB4的蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.4-6所示。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的产生卡那霉素B的链霉菌为产生卡那霉素B的菌株或通过生物技术手段得到的产生卡那霉素B的菌种。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的产生卡那霉素B的链霉菌为卡那链霉菌、黑暗链霉菌。

5.如权利要求1所述的一种利用组合生物合成技术制备地贝卡星的方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）双脱氧基因表达质粒的构建；

（2）卡那霉素B产生菌株的构建及获得；

（3）通过接合转移或其他技术手段将双脱氧基因表达质粒导入产生卡那霉素B的链霉菌中并使其内源性表达，催化卡那霉素B的3’,4’位脱羟基生成地贝卡星。