[发明专利]化合物trieffusols C-E制备方法及其在制备抗炎药物中的应用

说明书

本发明公开了化合物trieffusols C‑E及其制备方法和在制备抗炎药物中的应用。本发明所述的化合物trieffusols C‑E是从海洋真菌Trichobotrys effuse FS524的发酵培养物中分离制备得到的。经试验证明，化合物trieffusols C‑E对脂多糖LPS诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7炎症模型抑制一氧化氮NO的产生IC₅₀值为51.9±1.4,54.3±2.2,55.9±1.6,65.5±1.3μM，显示出比较显著的抗炎活性，可以用于制备抗炎药物。

技术领域

本发明属于医药生物技术领域，具体涉及化合物trieffusols C-E及其制备方法和在制备抗炎药物中的应用。

背景技术

炎症是动物机体局部或全身针对各类内源性或外源性损伤因子所作出的一系列复杂的防御反应。炎症反应参与机体众多疾病，其益处和有害作用之间的复杂性可能是许多疾病缺乏有效治疗的原因。目前市场上主要有糖皮质激素和非甾体2类抗炎药物；糖皮质激素类高剂量或长时间使用后副作用严重，非甾体抗炎药中非选择性的环氧合酶-2(COX-2)抑制剂由于抑制了保护胃肠道的COX-1而造成严重的胃溃疡并发症，而选择性的COX-2抑制剂也会增加心血管疾病恶化的风险。总之，现阶段炎症的治疗药物还是相对单一，有待于对炎症相关机制和药物的深入研究。当前，抗炎药物在医药市场的份额不断扩大。然而，目前市场上相当多的抗炎药物其临床疗效远未达到理想水平，部分药物副作用大。随着对炎症机制的不断深入研究，大量化学合成药物不断涌现，但此类药物均有诸多不良反应。因此，开发更加安全、有效的新型抗炎药物将具有广阔的临床应用前景。抗炎药物的主要来源是天然产物及其衍生物。海洋微生物由于代谢产物丰富、生长迅速、需求简单、可再生以及目的化合物产量高等优点，正成为新颖天然药物发现的重要源泉。

发明内容：

本发明的第一个目的是提供具有抗炎活性的化合物trieffusols C-E。

本发明的化合物trieffusols C-E，其结构如式(I)所示：

本发明的第二个目的是提供一种化合物trieffusols C-E的制备方法，该制备方法中所述的化合物trieffusols C-E是从海洋真菌Trichobotrys effuse FS524的发酵培养物中分离制备得到的，具体包括以下步骤：

(1)制备海洋真菌Trichobotrys effuse FS524的固体发酵培养物，用乙酸乙酯萃取该固体发酵培养物，将乙酸乙酯萃取液经浓缩后得浸膏；

(2)浸膏经过硅胶柱层析，用石油醚-乙酸乙酯以体积比为30:1，20:1，10:1，5:1，2:1，1:1和二氯甲烷-甲醇10:1，5:1，1:1分别作为洗脱剂，梯度洗脱；收集石油醚-乙酸乙酯体积比20:1洗脱获得的且经TLC薄层层析以正己烷：乙酸乙酯＝10:1v/v展开得Rf＝0.5-0.6的组分Fr.3；收集石油醚-乙酸乙酯体积比10:1洗脱的且经TLC薄层层析以正己烷:乙酸乙酯＝8:1v/v展开得Rf＝0.5-0.6的组分Fr.4；收集石油醚-乙酸乙酯体积比5:1洗脱获得的且经TLC薄层层析以正己烷:乙酸乙酯＝5:1v/v展开的Rf＝0.5-0.6的组分Fr.5；

将组分Fr.3经正相柱色谱，用石油醚-乙酸乙酯30:1，20:1，10:1，5:1，2:1，1:1v/v梯度洗脱，收集石油醚-乙酸乙酯5:1洗脱的组分Fr.3.4，经纯化得到化合物trieffusol E；

将组分Fr.4经Sephadex LH-20 CC凝胶柱色谱以二氯甲烷-甲醇＝1:1v/v洗脱，收集石油醚：乙酸乙酯＝5:1v/v展开得Rf＝0.65的组分Fr.4.5，经纯化得到消旋化合物trieffusol D，经进一步的手性拆分得到化合物(+)-trieffusol D和(-)-trieffusol D；