[发明专利]二硫键稳定的多肽组合物和使用方法

权利要求书

1.一种包含核酸构建体的基因疗法载体，所述核酸构建体包含：编码用于治疗遗传障碍的蛋白质的稳定形式的核酸，所述稳定形式包含一个或多个非天然半胱氨酸残基，所述一个或多个非天然半胱氨酸残基在所述蛋白质内的非天然半胱氨酸之间或在所述蛋白质的两个单体的非天然半胱氨酸之间形成二硫桥。

2.如权利要求1所述的基因疗法载体，其中所述蛋白质选自下组，该组由以下各项组成：α-半乳糖苷酶A、β-葡糖脑苷脂酶、葡糖脑苷脂酶、溶酶体酸性脂肪酶、糖胺聚糖α-L-艾杜糖醛酸酶、α-L-艾杜糖醛酸酶、N-磺基葡糖胺磺基水解酶(SGSH)、N-乙酰基-α-氨基葡糖苷酶(NAGLU)、艾杜糖醛酸-2-硫酸酯酶、N-乙酰半乳糖胺-6-硫酸酯酶、糖胺聚糖N-乙酰半乳糖胺4-硫酸酯酶、α-葡糖苷酶、三肽基肽酶1(TPP1)、棕榈酰蛋白硫酯酶(PPT)、神经元蜡样质脂褐质沉积症蛋白4、神经元蜡样质脂褐质沉积症蛋白10(组织蛋白酶D)、神经元蜡样质脂褐质沉积症蛋白11(颗粒蛋白前体)、神经元蜡样质脂褐质沉积症蛋白13(组织蛋白酶F)、神经元蜡样质脂褐质沉积症蛋白14(KCTD7)、神经元蜡样质脂褐质沉积症蛋白15(TBCK)以及细胞周期蛋白依赖性激酶样5。

3.如权利要求1所述的基因疗法载体，其中所述稳定的蛋白质包含溶酶体酶。

4.如权利要求1所述的基因疗法载体，其中所述稳定的蛋白质包含稳定的α-半乳糖苷酶(α-GAL)蛋白。

5.如权利要求4所述的基因疗法载体，其中所述稳定的α-半乳糖苷酶A(α-GAL)蛋白包含选自下组的一个或多个非天然半胱氨酸残基，该组由以下各项组成：(i)D233C和I359C；以及(ii)M51C和G360C。

6.如权利要求1所述的基因疗法载体，其中所述稳定的蛋白质包含稳定的棕榈酰蛋白硫酯酶1(PPT1)。

7.如权利要求6所述的基因疗法载体，其中所述稳定的PPT1蛋白包含非天然半胱氨酸残基A171C和A183C。

8.如权利要求1至7中任一项所述的基因疗法载体，其中与没有所述非天然半胱氨酸的相应蛋白质相比，所述稳定的蛋白质在pH 7.4下具有更长的半衰期。

9.如权利要求1所述的基因疗法载体，其中所述稳定的蛋白质可以替代所述遗传障碍中有缺陷或不足的蛋白质。

10.如权利要求1所述的基因疗法载体，其中所述稳定的蛋白质可以减轻或减缓与所述遗传障碍相关的一种或多种症状。

11.如权利要求1所述的基因疗法载体，其中与不稳定的蛋白质相比，所述稳定的蛋白质在减轻或减缓所述遗传障碍的一种或多种症状方面更有效。

12.如权利要求1所述的基因疗法载体，其中所述遗传障碍是神经障碍。

13.如权利要求1所述的基因疗法载体，其中所述遗传障碍是溶酶体贮积症。

14.如权利要求1所述的基因疗法载体，其中所述遗传障碍选自下组，该组由以下各项组成：天冬氨酰葡萄糖胺尿症、贝敦病、胱氨酸病、法布里病、I型戈谢病、II型戈谢病、III型戈谢病、庞贝病、泰-萨克斯病、桑德霍夫病、异染性脑白质营养不良、I型粘脂贮积病、II型粘脂贮积病、III型粘脂贮积病、IV型粘脂贮积病、贺勒病、亨特病、A型圣菲利波病、B型圣菲利波病、C型圣菲利波病、D型圣菲利波病、A型莫奎欧病、B型莫奎欧病、马罗托-拉米病、斯莱病、A型尼曼-皮克病、B型尼曼-皮克病、C1型尼曼-皮克病、C2型尼曼-皮克病、I型辛德勒病、II型辛德勒病、腺苷脱氨酶严重联合免疫缺陷(ADA-SCID)、慢性肉芽肿病(CGD)、婴儿期、幼年期和成年期形式的神经元蜡样质脂褐质沉积症以及CDKL5缺乏症。