[发明专利]制备在液体药物组合物中高度稳定的具有治疗活性的阿地白介素的方法

权利要求书

1.一种生产阿地白介素的方法，所述阿地白介素适合于制备包含药物水性载剂中的阿地白介素的组合物，所述方法包括：

将用编码阿地白介素基因的表达载体转染的细菌细胞进行发酵；

破碎所述细菌细胞；

收集含有阿地白介素的包涵体；

通过清洁剂使所述包涵体溶解，然后进行氧化和第一色谱；

用有机腈稀释并且进行第二色谱；

对所述阿地白介素进行透析过滤和灭菌。

2.权利要求1的方法，其中所述细菌细胞是大肠杆菌(Escherichia coli)细菌细胞。

3.权利要求1的方法，其中所述清洁剂是十二烷基硫酸钠(SDS)。

4.权利要求1的方法，其中所述氧化是用氧化性化合物进行的。

5.权利要求1的方法，其中所述第一色谱是陶瓷羟基磷灰石色谱。

6.权利要求1的方法，其中所述第二色谱是高效液相色谱(HPLC)。

7.权利要求6的方法，其中所述HPLC是C4柱HPLC色谱。

8.权利要求1的方法，其中通过体外生物学活性测定测量，所述阿地白介素在所述药物液体组合物中保持稳定达至少一年。

9.权利要求1的方法，其中通过动态光散射测量，所述阿地白介素在所述液体组合物中包含稳定的阿地白介素/SDS聚集体分布达至少一年，所述分布在约4nm-18nm范围内，具有约8nm处的峰。

10.权利要求1的方法，其中在人癌症的动物模型中测量，所述阿地白介素在所述液体组合物中具有稳定的治疗活性达至少一年。

11.权利要求1的方法，其中所述阿地白介素诱导细胞培养物中的人调节性T细胞增殖。

12.一种含有通过权利要求1的方法获得的阿地白介素的药物组合物，其中所述阿地白介素：a)通过体外生物学活性测定测量，在所述药物液体组合物中保持稳定至少一年，b)通过动态光散射测量，在所述液体组合物中具有稳定的阿地白介素/SDS聚集体分布至少一年，所述分布在约4nm-18nm范围内，具有约8nm处的峰，c)在人癌症的动物模型中测量，在所述液体组合物中具有稳定的治疗活性达至少一年，以及d)足以扩增细胞培养物中的人调节性T细胞。