[发明专利]一种鹿骨蛋白质提取物及其制备方法与应用

说明书

本发明公开了一种鹿骨蛋白质提取物及其制备方法与应用。该鹿骨蛋白质提取物是采用酸提加酶提法从马鹿骨和梅花鹿骨中提取到的蛋白质提取物，其能够从以下几个方面发挥修复、抗皱、抗皮肤衰老的作用：(1)细胞层面：①提高皮肤角质形成细胞的增殖活力和更新能力，②提高皮肤成纤维细胞的增殖活力，修复皮肤成纤维细胞由于氧化应激损伤所导致的增殖能力下降，从而促进内源性胶原蛋白的合成；(2)整体层面：外源性的鹿骨蛋白质提取物可透皮吸收进入真皮层并被整合为自身的胶原纤维，从而直接补充衰老皮肤所流失的胶原蛋白。

技术领域

本发明涉及生物医药领域中一种鹿骨蛋白质提取物及其制备方法与应用。

背景技术

皮肤作为机体最大的器官包括两种不同的主要成分，由角质形成细胞构成的持续更新的表皮及具有丰富基质由成纤维细胞构成的真皮。由于自然衰老和外界环境因素(特别是紫外线)的累积，皮肤组织的细胞结构和功能发生改变，往往引起松弛、皱纹等皮肤老化受损的表现。皮肤老化反映在细胞水平即为细胞衰老，增殖能力降低是细胞衰老最为直接的表现。

胶原蛋白由真皮结缔组织中的成纤维细胞合成，是细胞外基质中主要的结构蛋白。在皮肤中胶原蛋白以胶原纤维的形式存在，是皮肤的支撑结构，起到维持皮肤弹性、增加皮肤厚度、减少皱纹产生的作用。胶原蛋白缺乏，会导致皮肤出现干燥、粗糙、松弛等衰老现象。

众所周知，补充胶原蛋白能够修复受损皮肤，延缓皮肤衰老。胶原蛋白在化妆品、食品、保健品和医药领域有着巨大的应用前景。我国是养鹿业大国，鹿骨中含有丰富的胶原蛋白，约占57％，然而鹿骨作为一种胶原蛋白的优质资源却少有研究。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是如何获得无腥味、和/或能提高皮肤细胞抗氧化损伤活性和/或提高皮肤细胞的增殖活力的鹿骨蛋白质提取物。

为了解决以上技术问题，本发明提供了制备鹿骨蛋白质提取物的方法，该方法为酸提加酶提法制备鹿骨蛋白质提取物的方法。

本发明所提供的制备鹿骨蛋白质提取物的方法，包括如下步骤：

(1)酸提：用酸溶液对脱钙鹿骨粉进行提取，收集提取液，将该提取液命名为酸溶性胶原蛋白粗制液；

(2)酶提：向所述酸溶性胶原蛋白粗制液中加入胃蛋白酶进行酶解，酶解后过滤，收集滤液，将该滤液命名为酶促酸溶性胶原蛋白酶解液；

(3)盐析：对所述酶促酸溶性胶原蛋白酶解液进行盐析，收集沉淀；

(4)透析：对所述沉淀进行透析，得到鹿骨蛋白质提取物。

上述方法中，所述方法在对所述沉淀进行透析后还包括对得到的透析产物进行干燥得到固态的鹿骨蛋白质提取物的步骤。

上述方法中，所述酸提中所用的酸溶液的种类和浓度本领域技术人员可通过常规实验确定，如可为乙酸浓度为0.5mol/L的乙酸溶液。

上述方法中，所述酸提体系的pH值本领域技术人员可通过常规实验确定，如所述酸提在pH值为1.8的体系中进行。

上述方法中，所述酶提中，所述酸溶性胶原蛋白粗制液和胃蛋白酶的配比本领域技术人员可通过常规实验确定，如所述酸溶性胶原蛋白粗制液和胃蛋白酶的配比可为每1g所述脱钙鹿骨粉来源的所述酸溶性胶原蛋白粗制液：1000U胃蛋白酶，所述酸溶性胶原蛋白粗制液以其来源的所述脱钙鹿骨粉的质量计。

上述方法中，所述酶提中，所述酶解的温度和时间本领域技术人员可通过常规实验确定，如酶解的温度可为37℃，酶解的时间可为6h。

上述方法中，所述脱钙鹿骨粉为对经过脱钙处理的鹿骨进行粉碎后得到的骨粉。

所述脱钙鹿骨粉可按照包括下述步骤的方法制备：对鹿骨用水进行煎煮，收集骨头，将骨头浸泡于盐酸溶液中至骨头变软，用水冲洗至pH为中性，取出骨头，烘干，粉碎得到脱钙鹿骨粉。