[发明专利]一种糖基化麦谷蛋白的制备方法

说明书

本发明公开了一种糖基化麦谷蛋白的制备方法。该方法包括将小麦粉碎过筛、除淀粉、冻干、除脂、除清蛋白与球蛋白、除盐、除醇溶蛋白、冷冻干燥、研磨、均质、丙酮醛与麦谷蛋白糖化反应、超滤及真空冷冻干燥等步骤。本发明的糖基化麦谷蛋白方法简单，其麦谷蛋白的溶解度、乳化性及乳化稳定性显著提高。丙酮醛是麦谷蛋白与还原糖发生美拉德反应的中间产物，它与麦谷蛋白的相互作用降低了麦谷蛋白的疏水性，从而提高了其溶解性、乳化性和乳化稳定性。

技术领域

本发明涉及生物工程技术领域，尤其涉及一种糖基化麦谷蛋白的制备方法。

背景技术

麦谷蛋白是小麦中主要的蛋白质，麦谷蛋白来源丰富，营养价值高，应用范围广，具有较高的经济价值。麦谷蛋白具有独特的功能特性，主要应用于面粉、饲料、食品等领域。由于其独特的氨基酸组成方，使得溶解度、乳化性、起泡性等一些功能特性不佳。往往在直接使用中不能满足食品工业的需要，从而限制了它在食品加工中的应用范围及深度。因此，必须通过采用一些改良技术来弥补麦谷蛋白的这一缺陷，来改善其功能特性，拓宽其应用的领域。疏水性是溶解度和乳化性等功能特性的一个决定性因素。糖基化改性可以改变蛋白质疏水性，使蛋白质分子空间结构发生变化，最终增大蛋白质的溶解性，使蛋白质获得良好的功能特性，从而拓宽它的应用范围。

目前，改善蛋白功能特性的方法主要有化学法、物理法和酶法。其中化学改性由于具有对设备要求不高、成本较低、反应时间短且效果最为明显等优点，已成为蛋白改性的重要手段。针对小麦中的蛋白质经常用到的化学改性方法包括脱酰胺改性、磷酸化、酰化法、烷基化等。例如郑志等人通过脱酞胺改性小麦面筋蛋白来提高面筋蛋白的乳化性。目前通过化学改性来提高小麦中蛋白质功能性质的研究越来越多，这些方法包括脱酰胺改性、磷酸化，但很少有人研究糖基化改性小麦中蛋白质的功能性质。

发明内容

为了克服现有技术存在的不足，本发明的目的是提供一种糖基化麦谷蛋白的制备方法，能够得到一种糖基化麦谷蛋白，该麦谷蛋白溶解度＞40％，乳化性＞11.1m²/mg，乳化稳定性＞51.6％。

本发明通过如下技术方案实现：

一种糖基化麦谷蛋白的制备方法，包括如下步骤：

(1)粉碎过筛：将小麦粉碎后过筛，得到小麦面粉；过筛是过80-100目筛；

(2)除淀粉：用马丁法洗去小麦面粉中的淀粉，真空冷冻干燥得到面筋蛋白；

(3)除脂：加入正己烷除脂，通风橱过夜以除去正己烷，得到脱脂面筋蛋白；

(4)除清蛋白与球蛋白：将脱脂面筋蛋白与NaCl溶液混合均匀，室温下搅拌、离心、去上清，重复三次，得沉淀1；

(5)除盐：将沉淀1与水溶液混合均匀，室温下搅拌、离心、去上清，重复三次，得沉淀2；

(6)除醇溶蛋白：将沉淀2与乙醇溶液混合均匀，室温下搅拌、离心、去上清，重复三次，真空冷冻干燥后得麦谷蛋白，研磨成粉末备用；所得麦谷蛋白蛋白质量百分比含量为94％，溶解度为32％，乳化性为8.96m²/mg，乳化稳定性为28.88％；

(7)均质：准确称取一定量步骤6得到的麦谷蛋白粉末与超纯水溶液混合，得混悬液1，高速匀浆机分散，形成稳定悬浮液，并加入丙酮醛水溶液，得混悬液2；所述混悬液1的质量浓度为1-2mg/mL，所述匀浆机分散时间为10-20s，所述麦谷蛋白与丙酮醛的料液比为1:6-1:8(w/v)；

(8)改性：将混悬液2分装于哈希管中，加热得混悬液3；

(9)超滤离心：取混悬液3，冷却至室温后，超滤离心，得混悬液4；