[发明专利]一种鉴别杏仁的试剂盒及鉴别方法在审
| 申请号： | 201910388764.5 | 申请日： | 2019-05-10 |
| 公开（公告）号： | CN110205358A | 公开（公告）日： | 2019-09-06 |
| 发明（设计）人： | 王宪云;刘刚;王乐;李全海;李敏;郑明奇;蒋秀芳;邓彦东;马芳芳;尹亚娟 | 申请（专利权）人： | 河北医科大学第一医院 |
| 主分类号： | C12Q1/6816 | 分类号： | C12Q1/6816;C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司： | 石家庄国为知识产权事务所 13120 | 代理人： | 秦敏华 |
| 地址： | 050200 河*** | 国省代码： | 河北;13 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 杏仁 鉴别 试剂盒 探针 桃仁 假阳性率 热动力学 探针连接 荧光标记 荧光检测 中药鉴别 | ||
1.一种鉴别杏仁的试剂盒，其特征在于，包括杏仁探针，所述杏仁探针连接有荧光标记；
所述杏仁探针的序列为5′-AAAAAATTACC-3′。
2.根据权利要求1所述的鉴别杏仁的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括植物ITS2引物。
3.根据权利要求1所述的鉴别杏仁的试剂盒，其特征在于，所述荧光标记连接于所述探针的5′端。
4.根据权利要求3所述的鉴别杏仁的试剂盒，其特征在于，所述荧光标记为Cy2荧光标记或AlexaFluor488荧光标记。
5.一种鉴别杏仁的方法，其特征在于，用权利要求1～4任一项所述的鉴别杏仁的试剂盒对杏仁进行鉴别。
6.根据权利要求5所述的鉴别杏仁的方法，其特征在于，具体操作为：扩增待测物的基因组DNA，扩增完成后加入所述杏仁探针进行杂交，然后电泳，荧光检测。
7.根据权利要求6所述的鉴别杏仁的方法，其特征在于，所述杂交的方法为：向所述扩增引物中加入所述杏仁探针，95℃变性5min，76.5℃退火1min。
8.根据权利要求6所述的鉴别杏仁的方法，其特征在于，所述荧光检测的激发波长为488nm；和/或
所述电泳的条件为1％琼脂糖凝胶电泳，电压为180V。
9.根据权利要求6所述的鉴别杏仁的方法，其特征在于，扩增所述基因组DNA的反应体系为：100ng基因组DNA或10ng质粒DNA，ITS2引物10pmol/μL，DNA聚合酶1×，用双蒸水补齐至50μL；
反应程序为：95℃5min，共1个循环；95℃30s，54℃30s，72℃30s，共25个循环；72℃，5min，共1个循环；
所述杏仁探针的加入量为1pmol/μL。
10.权利要求1所述的鉴别杏仁的试剂盒在鉴别杏仁与桃仁中的应用。
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