[发明专利]一种寡肽化合物及其制备方法和用途有效
| 申请号: | 201811590770.0 | 申请日: | 2018-12-21 |
| 公开(公告)号: | CN109517031B | 公开(公告)日: | 2022-01-25 |
| 发明(设计)人: | 王建武 | 申请(专利权)人: | 闫龙飞 |
| 主分类号: | C07K5/09 | 分类号: | C07K5/09;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/16;C12P21/06;A61K38/06;A61P9/10;A61P9/14 |
| 代理公司: | 北京金信知识产权代理有限公司 11225 | 代理人: | 李维盈;韩飞 |
| 地址: | 571100 海南省海*** | 国省代码: | 海南;46 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 寡肽 化合物 及其 制备 方法 用途 | ||
1.一种以下结构式表示的寡肽化合物或其盐:
2.一种权利要求1所述的寡肽化合物的制备方法,所述方法包括以下步骤:
(1)预处理:采集新鲜鳄鱼血,室温静置直至其凝固,加入注射用水,粉碎,灭酶,然后冷却,离心,收集上清液;
(2)胃蛋白酶水解:将步骤(1)获得的上清液用稀盐酸调节pH,加入胃蛋白酶和氯化钙,进行水解;
(3)胰蛋白酶水解:加热将步骤(2)获得的胃蛋白酶水解液灭酶,冷却,用氢氧化钠溶液调节pH,加入胰蛋白酶,进行水解;
(4)制剂:加热将步骤(3)获得的胰蛋白酶水解液灭酶,冷却,离心,收集上清液,过滤;
(5)超滤:将步骤(4)获得的滤液进行超滤,收集分子量小于1000的部分,得到超滤酶解物,冷冻干燥,得到冻干粉末;以及
(6)分离提纯:将步骤(5)得到的冻干粉末加水溶解,采用制备色谱进行分离提纯,然后冷冻干燥,从而得到产物。
3.根据权利要求2所述的制备方法,其中,所述预处理步骤中,
所述注射用水的量为鳄鱼血的1-10倍重量,
所述离心在8℃以下进行,离心速度为3000-13000r/min,离心时间为20分钟以上,
所述灭酶通过在100℃以上加热10分钟以上。
4.根据权利要求3所述的制备方法,其中,所述预处理步骤中,
所述注射用水的量为鳄鱼血的3-7倍重量,
所述离心在6℃以下进行,离心速度为3000-13000r/min,离心时间为40分钟以上,
所述灭酶通过加热20-30分钟实现。
5.根据权利要求4所述的制备方法,其中,所述预处理步骤中,
所述注射用水的量为鳄鱼血的5倍重量,
所述离心在4℃以下进行,离心速度为7000r/min,
所述灭酶通过加热20分钟实现。
6.根据权利要求2所述的制备方法,其中,所述胃蛋白酶水解步骤中,
所述稀盐酸的浓度为1mol/L,
所述pH被调节至1-3,
所述水解的温度为35-40℃,所述水解的持续时间为1-6h,
基于上清液的总重,所述胃蛋白酶酶添加量为1-5wt%,氯化钙添加量为0.1wt%。
7.根据权利要求6所述的制备方法,其中,所述胃蛋白酶水解步骤中,
所述pH被调节至2,
所述水解的温度为37℃,所述水解的持续时间为1-4h,
基于上清液的总重,所述胃蛋白酶酶添加量为3wt%。
8.根据权利要求2所述的制备方法,其中,所述胰蛋白酶水解步骤中,
所述灭酶的过程通过在100℃以上的温度下加热20-60分钟,
所述氢氧化钠溶液的浓度为0.01-1mol/L,
所述pH被调节至7-10,
所述水解的温度调节为36-38℃,所述水解的持续时间为1-6h,以及
基于胃蛋白酶水解液的总重,胰蛋白酶添加量为1-5wt%。
9.根据权利要求8所述的制备方法,其中,所述胰蛋白酶水解步骤中,
所述灭酶的过程通过加热20-30分钟实现,
所述氢氧化钠溶液的浓度为0.1mol/L,
所述pH被调节至7.5-8.5,
所述水解的温度调节为36.5-37.5℃,所述水解的持续时间为1-4h,以及
基于胃蛋白酶水解液的总重,胰蛋白酶添加量为2wt%。
10.根据权利要求9所述的制备方法,其中,所述胰蛋白酶水解步骤中,
所述灭酶的过程通过在100℃以上的温度下加热20分钟实现,
所述水解的温度调节为37℃,所述水解的持续时间为2h。
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