[发明专利]一种线性假多肽及其制备方法与用途

说明书

本发明公开了一种线性假多肽及其制备方法与应用。本发明线型假多肽包含了Loloatin C药核序列结构的生物等电体结构，即包含了Tyr、Pro、Trp和Phe的生物等电体结构，四个氨基酸残基为L‑构型或D‑构型。本发明所述线性假多肽采用固相合成法制备得到的，总收率为18～40％。本发明线性假多肽的制备方法具有反应条件温和、容易自动化、操作简便安全、产品纯度高、总收率高的优点，所制备的线性假多肽可以用于制备抗氧化及抗衰老药物，特别是用于制备抗衰老药物。

技术领域

本发明涉及抗衰老多肽领域，具体涉及一种线性假多肽及其制备方法与其在抗氧化抗衰老药物中的应用。

背景技术

抗菌肽(Antimicrobial peptides，AMPs)是由机体特定基因编码且在外界诱导下产生的，大量存在于动物、植物及微生物中，是自然界生物体内极其重要的防御体系。它们是一类具有生物学活性的小分子多肽，一般由10～100个氨基酸残基组成。抗菌肽大多具有两亲性并且带有一定量的正电荷(通常为+2～+9)，属于阳离子多肽(Theis,T.,Stahl,U.Cellular and Molecular Life Sciences:CMLS 2004,61,437-455)。世界上第一个被发现的抗菌肽是天蚕素，是Boman等在1980年从诱导的惜古比天蚕蛹淋巴液中分离出的，随后人们从各种动植物以及微生物中发现并分离了多种具有抗菌活性的多肽，他们普遍具有抗菌谱广、抗菌效率高等特点，因此这类多肽物质被命名为“Antimicrobial peptides”，中文名为“抗菌肽”。

研究揭示，抗氧化作用是抗菌肽表现出来的重要生物活性之一。很多天然抗菌肽都具有抗氧化能力，如Lfcin、Magainins、Apidecin、Melittin以及Cecropi ns。目前对于抗菌肽的抗氧化作用机制尚未完全明确，一般而言，它与传统的抗氧化剂具有相似的作用机理，主要包括对自由基的清除、鳌合金属离子以及抑制脂质过氧化(Yang,H.,Wang,X,,Liu,X.,Wu,J.,Liu,C.,Gong,W.Mole cularCellular Proteomics Mcp 2009,8(3):571-583)。

机体内发生氧化反应会导致自由基的产生，自由基是指含有一个或多个不成对电子的原子团，如羟基自由基、超氧阴离子等。自由基具有极强的氧化性，病理状态下或者伴随着年龄增长，自由基在机体内大量产生却不能被及时地清除，就会导致其在细胞内堆积，并与机体内的生物大分子，如蛋白质、核酸、脂质等相互作用，生成过多的氧化物与过氧化物，最终就会对机体的新陈代谢造成严重影响。衰老以及很多疾病如肿瘤、肺气肿、心血管疾病、关节炎等都与自由基的损伤有关(Kullisaar,T.,Songisepp,E.,Mikelsaar,M.,Zilmer,K.,Vihalemm,T.,Zilmer,M.British Journal of Nutrition 2003,90(2):449-456)^[62]。

Loloatins抗菌肽家族包含4个成员，即Loloatin A、B、C和D，它们是在实验室条件下由采集于巴布亚新几内亚南部海滩沿岸大堡礁上的海洋微生物的发酵液中分离出来的一类环十肽抗菌素。研究发现，该家族中的Loloatin C[结构式为cyclo-(-L-Val-L-Orn-L-Leu-D-Tyr-L-Pro-L-Trp-D-Phe-L-Asn-L-Asp-L-Trp)]不仅对革兰氏阳性菌(G⁺)表现出和tyrocidine C一致甚至更好的抗菌活性，还对革兰氏阴性菌(G^-)Escherichia coli表现出明显的抗菌活性(Gerard,J.M.,et al.J.Nat.Prod.1999,62,80-85)。Chen随后的研究发现Loloatin C的药核结构为-D-Tyr-Pro-Trp-D-Phe-，即该四肽序列结构对Loloatin C抑菌活性的发挥起着关键的作用(Chen H.Preparation and Evaluation of the Loloatinsand Their Analogues.Ann Arbor,Mich:UMI,2003)。