[发明专利]一种高纯度褐藻寡糖的制备方法

说明书

本发明公开了一种高纯度褐藻寡糖的制备方法，属于褐藻深加工领域。本发明以海带汁生产中经水浸提后的海带下脚料为原料，清洗后打浆，然后利用保藏菌株XS1412C发酵所产褐藻胶裂解酶酶解，离心去除未酶解的海带渣后，即得高纯度褐藻寡糖溶液。本发明所得褐藻寡糖为2~7糖和7糖以上的寡糖混合物，褐藻寡糖总量占比大于80%，远远高于文献报道的18.9%。本发明所得褐藻寡糖中纯度非常高，非糖杂质含量小于14%。

技术领域

本发明涉及褐藻深加工领域，特别涉及一种高纯度褐藻寡糖的制备方法。

背景技术

海带是一种具有多种保健功能的大型经济褐藻，在中国东部沿海分布广泛，其产量居世界之最。海带加工技术水平的提升促进了海带精深加工的发展，随着褐藻胶裂解酶及其高产微生物菌株的不断发现，褐藻胶裂解酶已成为海带精深加工的重要工具酶，随着其β消去机制研究的深入，干海带中高达20%以上的褐藻多糖可以被褐藻胶裂解酶降解为以甘露糖醛酸或古罗糖醛酸为基本单元的寡糖或单糖。褐藻寡糖具有显著的调节免疫、抗病毒、抗肿瘤、抗凝血和抗氧化等功能，褐藻寡糖的相关研究也已成为国内外研究者关注的热点。

现有技术中干海带和鲜海带常被用作研究的原料，这种海带原料经不同来源的褐藻胶裂解酶酶解后，酶解液中褐藻寡糖的含量一般在0.5%-2.0%之间，同时酶解液中又含有大量的矿物质、碘、甘露醇、盐藻糖等多种营养成分，可以应用于许多食品行业中，有时过多的矿物质和碘会限制海带酶解液在食品行业中的应用。

然而褐藻寡糖类功能产品的发展也需要高纯度的褐藻寡糖，有报道称采用离子交换树脂柱从制备的海带寡糖匀浆中分离到纯度较高的寡糖混合物，由于褐藻寡糖是由古罗糖醛酸和甘露糖醛酸组成的聚合度不同的混合物，而且粘度大小不一，从众多组分中将褐藻寡糖分离出来非常困难，分离工艺繁琐且分离成本相对较高。

发明内容

为了弥补现有技术很难得到高纯度褐藻寡糖的不足，本发明提供了一种低成本高纯度褐藻寡糖的制备方法。

本发明的技术方案为：

产褐藻胶裂解酶的棒状杆菌菌株XS1412C，该菌株已保藏于中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为CCTCC No：2015149，其保藏时间为：2015年03月30日。

一种高纯度褐藻寡糖的制备方法，包括步骤：

1）用水清洗海带汁生产中水浸提后的海带下脚料；

2）将海带下脚料用打浆机搅打成海带浆；

3）调整pH为6.5-8.5，加入菌株XS1412C发酵所产褐藻胶裂解酶，在25℃-35 ℃下搅拌酶解4 h-12h；

4）离心分离未酶解的海带渣（主要为纤维素），收集上清液即得高纯度褐藻寡糖。

作为优选方案，步骤1）中，海带下脚料为干海带加水浸泡0.2-2小时，然后升温至50-90℃浸提1-5小时后的海带。

作为优选方案，步骤2）中，将海带下脚料搅打成100-200目的海带浆。

作为优选方案，利用菌株XS1412C产褐藻胶裂解酶的方法为：发酵培养基配方：褐藻胶3g-10g、磷酸氢二钾0.3g-1.2g、氯化铵0.8g-3.5g、陈海水0.3L-1.0L，pH 6.5-8.5；发酵条件为：按3%-6%接种量接种培养基，在26℃-35 ℃，120r/min-200r/min振荡培养10h-20h，得到XS1412C菌的褐藻胶裂解酶酶液。

作为优选方案，步骤3）中，褐藻胶裂解酶的重量为海带浆重量的0.05%-1%。

作为优选方案，步骤3）中，酶解温度为28℃-32℃。

作为优选方案，步骤3）中，搅拌速度为100r/min-200r/min。