[发明专利]大豆分子标记及其在检测大豆种子营养价值中的应用

说明书

本发明公开了大豆分子标记及其在检测大豆种子营养价值中的应用。本发明公开的大豆分子标记为A1)或A2)：A1)以大豆的基因组DNA为模板，采用引物对A1进行扩增得到的DNA分子；所述A1由名称分别为A1‑F和A1‑R的两条单链DNA组成，所述A1‑F为与大豆基因组中序列1的第346位上游特异结合的单链DNA，所述A1‑R为与大豆基因组中序列1的第346位下游特异结合的单链DNA；A2)大豆基因组DNA中对应于序列表中序列1的第346位的核苷酸。实验证明，本发明的大豆分子标记与种子蛋白中11S/7S比值有关，可通过检测本发明的大豆分子标记和相应的基因型检测种子蛋白中11S/7S比值。

技术领域

本发明涉及生物技术领域中，大豆分子标记及其在检测大豆种子营养价值中的应用。

背景技术

大豆种子蛋白是重要的植物蛋白来源，具有丰富的营养价值。大豆是我国仅次于玉米、小麦和水稻的第四大作物，是我国主要的粮食和油料作物之一。由于大豆具有极高营养价值、高生理活性和广泛工业用途，世界对大豆的需求日益增加。

大豆种子中70％的贮藏蛋白是球蛋白和β-伴球蛋白。球蛋白和β-伴球蛋白又可称作为11S球蛋白和7S球蛋白，它们之间又是显著负相关关系。7S球蛋白的含硫氨基酸比11S球蛋白的含硫氨基酸要低3～4倍，而且大豆的营养价值和含硫氨基酸(蛋氨酸和半胱氨酸)的含量密切相关，含硫氨基酸的含量越高，营养价值越高。因此，研究11S球蛋白和7S球蛋白的比值以及含硫氨基酸的含量，对提高大豆营养价值具有重要的价值。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是如何检测大豆种子的营养价值，尤其是含硫氨基酸的含量，以及如何检测大豆种子中11S球蛋白和7S球蛋白的含量及二者的比值。

为解决上述技术问题，本发明首先提供了一种大豆分子标记，所述大豆分子标记为A1)或A2)：

A1)以大豆的基因组DNA为模板，采用引物对A1进行扩增得到的DNA分子；所述A1由名称分别为A1-F和A1-R的两条单链DNA组成，所述A1-F为与大豆基因组中序列1的第346位上游特异结合的单链DNA，所述A1-R为与大豆基因组中序列1的第346位下游特异结合的单链DNA；

A2)大豆基因组DNA中对应于序列表中序列1的第346位的核苷酸。所述大豆分子标记的多态性可为大豆基因组中对应于序列1的第346位为G或A。

所述A1-F可为序列1的第1-20位所示的单链DNA，所述A1-R可为与序列1的第1578-1598位反向互补的单链DNA。

为解决上述技术问题，本发明还提供了鉴定大豆基因型的方法，所述基因型为GG基因型、GA基因型和AA基因型，所述方法包括如下Ⅰ或Ⅱ或Ⅲ或Ⅳ：

Ⅰ、检测待测大豆基因组中对应于序列表中序列1的第346位的核苷酸，如所述待测大豆基因组中两条染色体均为下述g1)的染色体，所述待测大豆为GG基因型；如所述待测大豆基因组中两条染色体均为下述g2)的染色体，所述待测大豆为AA基因型；如所述待测大豆基因组中两条染色体中一条为下述g1)的染色体，另一条为下述g2)的染色体，所述待测大豆为GA基因型；

g1)对应于序列表中序列1的第346位的核苷酸为G；

g2)对应于序列表中序列1的第346位的核苷酸为A；

Ⅱ、如下K1)和K2)：

K1)以待测大豆基因组DNA为模板，采用所述A1进行PCR扩增得到PCR产物；

K2)检测步骤K1)得到的PCR产物的序列，根据所述PCR产物确定大豆基因型：