[发明专利]一种柑橘黄龙病菌的巢式PCR检测方法在审
| 申请号： | 201810429977.3 | 申请日： | 2018-05-08 |
| 公开（公告）号： | CN108611430A | 公开（公告）日： | 2018-10-02 |
| 发明（设计）人： | 洪艳云;易图永;罗永阳;戴良英;谭小平 | 申请（专利权）人： | 湖南农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/686;C12Q1/04;C12R1/01 |
| 代理公司： | 北京知本村知识产权代理事务所 11039 | 代理人： | 刘江良 |
| 地址： | 410128 *** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 柑橘 病菌 巢式PCR 检测 合成酶 外膜蛋白基因 特异性引物 高度保守 基因片段 检测技术 克隆测序 快速精准 扩增产物 两对引物 外膜蛋白 在线比对 对引物 基因 覆盖 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种柑橘黄龙病菌的巢式PCR精准检测方法，其特征在于：该方法是以两对柑橘黄龙病菌特异性引物对待测样品进行巢式PCR扩增，最后电泳鉴定；该特异性引物为：
第一对引物为F3/B3:正向引物：5’-GGTTATGCTGCCGTTAAAGTGTC-3’
反向引物: 5’-AACCAGCCCTTTCAGGAACAAG-3’
第二对引物为F1/B1:正向引物：5’-TCTGAGGGTGAGCGTAAAACAACTG-3’
反向引物: 5’-TTGGGAAATAGAATGGCTGCTGAAT-3’。
2.如权利要求1所述的柑橘黄龙病菌的巢式PCR检测方法，其特征在于：
PCR反应体系各主要成分及用量
组分 初始浓度 用量 2+)]]> 10× 2.0μl dNTPs 10mmol/L 1.6μl 正向引物 12.5pmol/μl 0.4μl 反向引物 12.5pmol/μl 0.4μl TaqDNA酶 5U/μl 0.4μl DNA模板 50ng/μl 1.0μl 2O]]> 14.2μl
。
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