[发明专利]检测培养基以及复合微生态制剂中乳酸菌总数的检测方法在审
申请号: | 201711452460.8 | 申请日: | 2017-12-26 |
公开(公告)号: | CN108085362A | 公开(公告)日: | 2018-05-29 |
发明(设计)人: | 吴微;张茜茜;詹志春;周樱;谌颉 | 申请(专利权)人: | 武汉新华扬生物股份有限公司;湖北华扬科技发展有限公司 |
主分类号: | C12Q1/06 | 分类号: | C12Q1/06;C12Q1/04 |
代理公司: | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人: | 王闯 |
地址: | 430000 湖北*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 培养基 乳酸菌 检测 复合微生态制剂 重量份 麦芽糖 蒸馏水 微生物检测技术 谷氨酸钠 酵母浸粉 快速检测 类微生物 柠檬酸铵 山梨酸钾 准确检测 硫酸镁 硫酸锰 琼脂粉 乙酸钠 种检测 酵母 牛肉 改良 生长 | ||
1.一种检测培养基,其特征在于,其组分按重量份数计包括:牛肉浸粉5-10份、酵母浸粉5-8份、麦芽糖5-20份、硫酸镁0.1-0.3份、乙酸钠3-5份、柠檬酸铵10-20份、硫酸锰0.05-0.1份、山梨酸钾0.2-0.8份、谷氨酸钠1-5份、琼脂粉15-20份以及蒸馏水1000份;所述检测培养基的pH值为5.5-7.0。
2.根据权利要求1所述的检测培养基,其特征在于,所述检测培养基的所述组分按重量份数计包括:牛肉浸粉8-10份、酵母浸粉5-6份、麦芽糖10-20份、硫酸镁0.1-0.2份、乙酸钠3-4份、柠檬酸铵10-15份、硫酸锰0.05-0.07份、山梨酸钾0.2-0.5份、谷氨酸钠2-5份、琼脂粉15-18份以及蒸馏水1000份;所述检测培养基的pH值为5.5-6.0。
3.根据权利要求1所述的检测培养基,其特征在于,所述检测培养基中还包括苯甲酸、苯甲酸钠、苯甲酸钾、对羟基苯甲酸、对羟基苯甲酸乙酯以及对羟基苯甲酸丁酯中的一种或多种;优选地,所述检测培养基中还包括对羟基苯甲酸乙酯1-5份以及对羟基苯甲酸丁酯1-5份。
4.根据权利要求1所述的检测培养基,其特征在于,所述检测培养基的灭菌温度为115℃-121℃灭菌20-30分钟。
5.根据权利要求1-4任一项所述的检测培养基,其特征在于,所述山梨酸钾是由山梨酸、碳酸钾以及叶酸溶于水中,于70-80℃下反应30-40min得到山梨酸钾溶液,将所述山梨酸钾溶液烘干,得到所述山梨酸钾;其中,所述山梨酸、所述碳酸钾以及所述叶酸的质量比为:1:0.3-0.4:0.03-0.06。
6.根据权利要求1-4任一项所述的检测培养基,其特征在于,所述谷氨酸钠的制备方法包括:将淀粉、尿素、磷酸钾、硫酸铁和硫胺混合后杀菌,接种嗜氨小杆菌,搅拌培养,在搅拌过程中送入无菌空气,经过滤除去菌体后得到谷氨酸结晶体,利用碳酸钠中和所述谷氨酸结晶体,得到谷氨酸钠。
7.一种复合微生态制剂中乳酸菌总数的检测方法,其特征在于,其包括以权利要求1-6任一项所述的检测培养基对复合微生态制剂的待检测样品进行培养,并对长出的菌落进行计数和观察。
8.根据权利要求7所述的复合微生态制剂中乳酸菌总数的检测方法,其特征在于,所述复合微生态制剂中至少包括酵母菌和乳酸菌。
9.根据权利要求7所述的复合微生态制剂中乳酸菌总数的检测方法,其特征在于,
取样品,用生理盐水稀释至预设浓度得菌悬液;
将灭菌后的所述检测培养基倒入空白培养皿中,冷却制成培养基平板,将所述菌悬液涂布于所述培养基平板上;
将涂布有所述菌悬液的所述培养基平板培养24-72h,观察长出的单菌落,选择含有30-300个菌落的培养基平板进行结果计算;
乳酸菌单菌落形态观察:在本发明培养基上,乳酸菌为乳白色、圆形、边缘整齐、凸起、表面有光泽,菌落直径0.5-2mm。
10.根据权利要求7所述的复合微生态制剂中乳酸菌总数的检测方法,其特征在于,稀释所述样品包括:先将所述样品置于生理盐水中制成浓度为0.01的中间菌悬液,然后再取所述中间菌悬液置于生理盐水中配制形成浓度为0.001的所述菌悬液。
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