[发明专利]一种苯甲酸酯类化合物及其制备方法与应用

说明书

本发明涉及一种苯甲酸酯类化合物及其制备方法与应用，所述小分子化合物为苯甲酸酯类化合物(E)‑4‑((4‑(4‑(4‑(3‑甲氧基‑3‑氧代丙‑1‑烯基)苯烯基)苯甲酰基)哌嗪甲酰基)哌嗪‑1‑羰基)‑苄氧基)‑苄氧基)‑苯甲酸酯，能有效抑制泛素连接酶Nedd4与泛素结合酶UbCH5c的相互作用，体外泛素化实验也证明该苯甲酸酯类化合物能有效抑制Nedd4底物TMEPAI的体外泛素化，同时MTT实验证明该苯甲酸酯类化合物对人乳腺癌MCF7细胞具有一定的杀伤作用，其IC50值为60μM，可以靶向抑制Nedd4活性并可作为一种全新的抗肿瘤药物。

技术领域

本发明涉及一种化合物及其制备方法与应用，尤其是一种苯甲酸酯类化合物及其制备方法与应用。

背景技术

恶性肿瘤已经成为危害人类生命与健康的重大疾病之一。世界卫生组织报告显示，2008年全世界约有1270万恶性肿瘤新增患者，760万死于恶性肿瘤。因此，进一步研究肿瘤发生和发展的机制，开发新型抗肿瘤药物，减轻肿瘤对人类生命健康的威胁，是一个重要的研究课题。传统的抗肿瘤药物主要包括细胞毒药物、影响激素平衡的药物和生物反应调节剂等。近年来，随着恶性肿瘤研究的不断深入和抗肿瘤药物研究的发展，出现了许多新型的针对不同靶点的分子靶向药物。例如，美国食品医药管理局(FDA)于2003年批准了应用一种新型的蛋白酶体抑制剂硼替佐米(bortezomib，商品名：万珂Velcade)来治疗多发性骨髓瘤。硼替佐米能够特异性抑制哺乳动物细胞内26S蛋白酶体的类胰凝乳蛋白酶(chymotrypsin-like)活性，对细胞内一连串的信号转导产生影响，最终导致癌细胞死亡。研究表明，硼替佐米对治疗包括骨髓瘤、非小细胞肺癌、头颈癌、卵巢癌和前列腺癌在内的多种恶性肿瘤均显示出良好的疗效。但是，这种以蛋白酶体为靶向性的治疗药物的一个显而易见的缺陷就是特异性差，在杀死恶性肿瘤细胞的同时对正常细胞也有很强的毒副作用，因此，需要寻找更为特异的靶点和药物。

蛋白的泛素化调节从生殖、发育、生长到衰老等一系列重要生命活动过程，它的异常将导致严重的疾病，包括神经退行性疾病和癌症等，对此通路的调控已被证明是疾病治疗中的一种革命性新方法。泛素-蛋白酶体系统的底物特异性由E3泛素连接酶决定，它决定底物泛素化的时间性和特异性，因此以E3泛素连接酶为肿瘤治疗靶点比以蛋白酶体为靶点更为理想。E3泛素连接酶受到转录水平上的调节、翻译后磷酸化修饰、与活化子或抑制子结合以及被自身泛素化修饰等一系列精密的调控，以保障细胞中各种蛋白质的“数量”和“质量”都处于最佳生理水平。一旦这些调控机制受到破坏，往往就会导致细胞生理上的病变。许多威胁人类健康的疾病，如癌症和神经退行性疾病都与泛素连接酶功能上的紊乱密切相关。最近有研究发现，以Skp2泛素连接酶为靶点筛选得到的Skp2小分子抑制剂在多种动物肿瘤模型中都表现出良好的抗肿瘤效果。

Nedd4(Neuronal precursor cell-expressed developmentally down-regulated 4)蛋白是一种HECT家族的E3泛素连接酶，最初人们发现Nedd4在小鼠脑的发育过程中表达下调。但随着研究的深入，人们认识到Nedd4在神经细胞和心脏的发育、细胞膜受体蛋白的内吞、T细胞的成熟等过程中都发挥重要作用。更为重要的是，Nedd4与肿瘤的发生和发展密切相关。随着越来越多的Nedd4泛素化底物被鉴定，人们发现Nedd4可以通过多种机制促进肿瘤的发生和发展。研究发现，Nedd4的一个重要底物是PTEN(Phosphatase andtensinhomolog)。PTEN作为一种磷酸酶，可以抵抗PI3K/AKT信号途径，从而抑制细胞增殖。PTEN在人类的多种肿瘤中都发生突变或缺失。Nedd4可以多聚泛素化PTEN并经蛋白酶体途径降解；而单泛素化的PTEN可以入核，并在核质之间穿梭。研究表明，在前列腺癌和膀胱癌中，Nedd4的表达量升高，导致PTEN降解加快并促进PI3K/AKT信号激活，最终导致细胞无限增殖。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于提供一种苯甲酸酯类化合物。