[发明专利]一种海洋沉积物中邻苯二甲酸酯类环境激素的分散固相萃取-气相色谱-质谱检测方法

权利要求书

1.一种海洋沉积物中邻苯二甲酸酯类环境激素的分散固相萃取-气相色谱-质谱检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）样品的采集和制样：将待检测的海洋沉积物样品置于冷冻干燥机中干燥12～24h，取出过80～100目不锈钢筛，得到待测样品，置于干燥器内待测；

（2）取样和超声波萃取：称取2g上述待测样品，置于玻璃离心管中，加入10～20mL体积比为1:1的正己烷/乙酸乙酯萃取剂，涡旋1～3min，以300～400W功率于30～40℃超声波提取10～20min；当样品中含硫化合物的背景干扰时，加入1～3g铜粉超声脱硫，3000～6000r/m高速离心3～5min，取上清液，得到正己烷/乙酸乙酯提取液，所述正己烷/乙酸乙酯提取液过无水硫酸钠柱；再向样品中加入10～20mL体积比为1:1的正己烷/二氯甲烷萃取剂，重复上述过程，得到正己烷/二氯甲烷提取液；将所述正己烷/乙酸乙酯提取液和正己烷/二氯甲烷提取液合并，得到混合提取液；

（3）浓缩：将步骤（2）得到的混合提取液，在水泵真空度0.08～0.09Mpa，水浴温度35～40℃，转速50～100rpm条件下，用旋转蒸发仪蒸发至干，加入2mL正己烷溶解，得到正己烷溶解液；

（4）分散固相萃取净化：取100～200mg石墨化炭黑于试管中，加入步骤（3）得到的正己烷溶解液，涡旋30～60s，3000～6000r/m高速离心1～3min，取上清液a；再向上述石墨化炭黑中加入2mL丙酮，重复上述涡旋离心过程，取上清液b；再向上述石墨化炭黑中加入2mL二氯甲烷，重复上述涡旋离心过程，取上清液c；再向上述石墨化炭黑中加入2mL甲醇，重复上述涡旋离心过程，取上清液d；合并上清液a、b、c、d，得到混合上清液；

（5）浓缩定容：将步骤（4）得到的混合上清液在水浴温度40～50℃下，吹氮气蒸发至干，用正己烷溶解，并定容至1mL，作为上机溶液；

（6）气相色谱-质谱检测器检测：进样针抽取上述上机溶液，按照设定好的气相色谱-质谱条件进行检测；气相色谱柱选用HP-35MS毛细管气相色谱柱；气相色谱柱升温程序为：初始温度100℃，以10℃/min升温至290℃；保持5.0min，总运行时间24min；

（7）标准曲线绘制：以选择离子监测模式定性，外标法定量；

选择离子监测模式进行定性时，将标准溶液按照上述步骤（6）的要求进行操作得到标准溶液的总离子流图色谱图，并与单个分析物的总离子流图色谱图进行定性离子、定量离子比较，同时结合保留时间，确定16种邻苯二甲酸酯的种类；所述16种邻苯二甲酸酯的定性离子、定量离子、保留时间用以作为外标法定量时，16种邻苯二甲酸酯色谱峰识别的依据；所述的标准溶液中溶质为邻苯二甲酸酯，溶剂为正己烷，浓度均为100μg/L；

外标法定量时，将不同加标浓度的标准曲线系列溶液，根据加入的邻苯二甲酸酯浓度和相应定量离子积分峰面积的对应关系建立标准曲线；所述标准曲线系列溶液中溶质为邻苯二甲酸酯，溶剂为正己烷，浓度范围均为1～1000μg/L；

（8）回收率测定：将采集到的实际样品，按照上述步骤（1）～（6）的要求进行操作，并与上述步骤（7）得到的标准曲线比较，通过换算最终得到实际样品中16种邻苯二甲酸酯的含量；所述16种邻苯二甲酸酯为苯二甲酸二甲酯，邻苯二甲酸二乙酯，邻苯二甲酸二异丁酯，邻苯二甲酸二丁酯，邻苯二甲酸二-4-甲基-2-戊基酯，邻苯二甲酸二甲氧基乙酯，邻苯二甲酸二正戊酯，邻苯二甲酸二乙氧基乙基酯，邻苯二甲酸二己酯，邻苯二甲酸丁苄酯，邻苯二甲酸二-2-乙基己酯，邻苯二甲酸二丁氧基乙基酯，邻苯二甲酸二环己酯，邻苯二甲酸二正辛酯，邻苯二甲酸二苯酯和邻苯二甲酸二壬酯；

将不同加标浓度的加标样品，按照上述步骤（2）～（6）的要求分别进行五次平行操作，并与上述步骤（7）得到的标准曲线比较，通过换算最终得到加标样品中16种邻苯二甲酸酯的测定浓度；按照下式进行回收率计算：

；

式中：R——回收率，%；

C_s——加标样品中16种邻苯二甲酸酯的测定浓度，μg/kg；

C₀——实际样品中16种邻苯二甲酸酯的浓度，μg/kg；

C——加标样品中16种邻苯二甲酸酯的理论加标浓度，μg/kg；

所述加标样品为经步骤（1）预处理后的实际样品中加入邻苯二甲酸酯后的样品。