[发明专利]一种葡萄籽蛋白酶解物及其制备方法

权利要求书

1.一种葡萄籽蛋白酶解物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)葡萄籽的预处理：将干燥的葡萄籽粉碎，得葡萄籽粉；

(2)制备葡萄籽蛋白：

将葡萄籽粉和石油醚按照1g：1.5～2.5ml的料液比混合均匀，在室温下静置4～6h后，待料液出现分层，回收下层沉淀物并清洗，得脱脂葡萄籽粉；

向脱脂葡萄籽粉中加入0.05～0.15mol/L的氢氧化钠溶液，在40～50℃下浸提1.5～2.5h后，再在4℃下离心，取上清液，得碱性溶液；所述脱脂葡萄籽粉的质量与氢氧化钠溶液的体积比为1g：10～20ml；

向碱性溶液中加入盐酸溶液至pH值为3.8，静置至蛋白质完全沉淀，得蛋白质混合液；

将蛋白质混合液在4℃下离心，回收沉淀物，再冷冻干燥，得葡萄籽蛋白；

(3)酶解葡萄籽蛋白：

将葡萄籽蛋白和生物酶按照1:0.005～0.025的质量比，完全溶解于水中，在40～60℃下进行酶解反应，得多肽混合液；所述生物酶为碱性蛋白酶或复合蛋白酶，所述复合蛋白酶由碱性蛋白酶和中性蛋白酶组成；

将多肽混合液在4℃下离心，回收沉淀物，再干燥沉淀物，得葡萄籽蛋白酶解物。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，其中，

所述步骤(1)中，葡萄籽粉过80～120目筛；

所述步骤(2)中，所述将脱脂葡萄籽粉在氢氧化钠溶液中浸提后，在3500～4500r/min下，离心15min；

所述蛋白质混合液在3500～4500r/min下，离心15min；

所述步骤(3)中，所述生物酶为碱性蛋白酶时，反应时间为0.5～4h，反应pH值为7.0～8.6；所述生物酶为复合蛋白酶时，反应时间为1～5h，反应pH值为6.2～7.8。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，其中，

所述步骤(2)中，所述盐酸溶液的浓度为3～5mol/L；

所述步骤(3)中，采用氢氧化钠溶液和盐酸溶液调整溶液pH值。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，其中，

所述步骤(2)中，所述冷冻干燥的温度为-45～-55℃；

所述步骤(3)中，所述多肽混合液在3500～4500r/min下，离心15min。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，其中，

所述步骤(2)中，所述将葡萄籽粉和石油醚按照1g：2ml的料液比混合，静置5h；

所述氢氧化钠溶液的浓度为0.1mol/L；

所述盐酸溶液的浓度为4mol/L；

所述步骤(3)中，所述干燥温度为35～45℃。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，其中，

所述步骤(2)中，所述脱脂葡萄籽粉的质量与氢氧化钠溶液的体积比为1g：15ml；

所述步骤(3)中，所述葡萄籽蛋白和生物酶的质量比为1:0.02。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，其中，

所述步骤(2)中，所述浸提温度为45℃，时间为2h。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，其中，

所述步骤(2)中，所述将脱脂葡萄籽粉在氢氧化钠溶液中浸提后，在4000r/min下离心；

所述将蛋白质混合液在4000r/min下离心；

所述步骤(3)中，多肽混合液在4000r/min下离心。

9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，其中，

所述步骤(2)中，所述冷冻干燥的温度为-50℃；

所述步骤(3)中，所述干燥温度为40℃。

10.一种葡萄籽蛋白酶解物，其特征在于，所述葡萄籽蛋白酶解物由权利要求1～9任一项制备方法制备得到。