[发明专利]一种火龙果花蛋白多肽的制备方法

权利要求书

1.一种火龙果花蛋白多肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)选取火龙果花作为原料，将火龙果花放入太阳能-热泵联合系统中进行烘干，将干燥后的火龙果花放入超微粉碎机中粉碎12-15min，得到火龙果花粉；

(2)将步骤(1)所得火龙果花粉放于锥形瓶中，按照料液比为1:9-10的比例加入蒸馏水混合均匀，将锥形瓶内混合物的pH值调至9-10后，将锥形瓶放于超声波-微波组合反应系统中提取60-80min，取出后，将锥形瓶内物质通过离心机于转速为9000-9500r/min的条件下离心8-10min，将所得上清液a保留备用；

(3)将步骤(2)所述上清液a用酸碱调节剂调节至pH值为4.5-5.0，然后通过离心机于转速为9000-9500r/min的条件下离心7-9min，得到为粗蛋白沉淀a和上清液b，将上清液b按料液比1∶3-4加入体积浓度为70-72％的乙醇溶液，4-6℃搅拌提取3-5h，再按料水比1∶12-15加入蒸馏水充分搅拌1h，于9000-9500r/min离心10-20min后，收集沉淀，得到粗蛋白沉淀b；

(4)脱色：将粗蛋白沉淀a和粗蛋白沉淀b混合均匀，像其中按照料液比为1:10-12的比例加入蒸馏水混合均匀，用酸碱调节剂调节pH值至4.0-4.5，向其中加入0.8-1.2％的活性炭进行脱色35-40min，除去活性炭得到蛋白水解液；

(5)将蛋白水解液中按0.8-1.2g/100mL加入碱性蛋白酶，于温度为55-60℃、pH值为7.2-7.6的条件下水解2-3h，再向其中按0.4-0.6g/100mL加入复合风味蛋白酶水解2-3h，将处理后的液体经过板框过滤机过滤，所得滤液即为多肽溶液，将多肽溶液于-40℃温度下真空干燥，得到成品多肽；

在步骤(2)中，所述超声波-微波组合反应系统的提取温度为60-70℃，所述提取超声波的功率为150-200W，微波功率为300-350W；

在步骤(5)中，所述复合风味蛋白酶是由下述方法制备：将米曲霉菌株转接至查式斜面培养基中，在28-32℃下培养52-55h，然后把培养好的菌株孢子放于距离紫外灯25cm处照射50-60s，再将菌株孢子放入装有营养液的锥形瓶中，在温度为28-30℃、振荡速度为120-140r/min的条件下振荡15-20h，然后稀释成浓度为10^7-9个/mL的菌悬液即可；

所述营养液是由葡萄糖、硫酸铵、氯化钙、磷酸二氢钾、氯化钠、硫酸锌、水按照15-18:0.1-0.2:0.002-0.004:0.3-0.5:0.06-0.08:0.01-0.02:1000的质量比混合制成。

2.根据权利要求1所述的一种火龙果花蛋白多肽的制备方法，其特征在于，在步骤(1)中，火龙果花粉过80-100目筛。

3.根据权利要求1所述的一种火龙果花蛋白多肽的制备方法，其特征在于，在步骤(3)中，所述酸碱调节剂为0.1mol/L的醋酸溶液或0.1mol/L的碳酸钠溶液。

4.根据权利要求1所述的一种火龙果花蛋白多肽的制备方法，其特征在于，在步骤(4)中，所述活性炭过60-80目筛。