[发明专利]大豆分子标记及其多态性在鉴定大豆分枝数性状中的应用有效
申请号: | 201710536426.2 | 申请日: | 2017-07-04 |
公开(公告)号: | CN109234423B | 公开(公告)日: | 2022-04-12 |
发明(设计)人: | 邱丽娟;郭勇;张霞;张勇;杨兴勇 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院作物科学研究所 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅 |
地址: | 100081 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 大豆 分子 标记 及其 多态性 鉴定 分枝 性状 中的 应用 | ||
1.大豆分子标记或其多态性在鉴定或辅助鉴定大豆分枝数性状中的应用;
所述大豆分子标记为以大豆基因组DNA为模板、采用引物对BRCH进行扩增得到的DNA分子,其序列为序列1或序列2;
所述BRCH由名称为BRCH_F和BRCH_R的单链DNA组成,所述BRCH_F为与大豆基因组DNA中序列1的第84位上游特异结合的单链DNA,所述BRCH_R为与大豆基因组DNA中序列1的第84位下游特异结合的单链DNA。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:所述BRCH_F为序列1的第1-20位所示的单链DNA,所述BRCH_R为与序列1的第173-197位所示单链DNA反向互补的单链DNA。
3.大豆分子标记,所述大豆分子标记为以大豆基因组DNA为模板、采用引物对BRCH进行扩增得到的DNA分子,其序列为序列1或序列2。
4.鉴定或辅助鉴定大豆分枝数性状的成套试剂,由引物对BRCH与TaqⅠ组成,所述引物对BRCH由名称为BRCH_F和BRCH_R的单链DNA组成,所述BRCH_F为序列1的第1-20位所示的单链DNA,所述BRCH_R为与序列1的第173-197位所示单链DNA反向互补的单链DNA。
5.鉴定或辅助鉴定大豆基因型的方法,所述基因型为GG基因型、GT基因型和TT基因型,所述方法为下述Q或R:
Q、包括如下Q1)和Q2):
Q1)以待测大豆基因组DNA为模板,利用引物对BRCH进行PCR扩增得到PCR产物;所述引物对BRCH由名称为BRCH_F和BRCH_R的单链DNA组成,所述BRCH_F为序列1的第1-20位所示的单链DNA,所述BRCH_R为与序列1的第173-197位所示单链DNA反向互补的单链DNA;
Q2)检测步骤Q1)得到的PCR产物的序列,如果所述PCR产物的序列为序列1,所述待测大豆为TT基因型大豆;如果所述PCR产物的序列为序列1和序列2,所述待测大豆为GT基因型大豆;如果所述PCR产物的序列为序列2,所述待测大豆为GG基因型大豆;
R、包括如下R1)和R2):
R1)以待测大豆基因组DNA为模板,利用所述引物对BRCH进行PCR扩增得到PCR产物,采用限制性内切酶TaqI处理所述PCR产物得到酶切产物;
R2)检测步骤R1)得到的酶切产物的大小,如果所述酶切产物在50-250bp间为一条DNA片段,所述待测大豆为GG基因型大豆;如果所述酶切产物在50-250bp间为三条DNA片段,所述待测大豆为GT基因型大豆;如果所述酶切产物在50-250bp间为两条DNA片段,所述待测大豆为TT基因型大豆。
6.鉴定或辅助鉴定大豆分枝数性状的方法,包括:利用权利要求5所述方法鉴定待测大豆的基因型,GG基因型待测大豆的分枝数大于GT基因型待测大豆,GG基因型待测大豆的分枝数大于TT基因型待测大豆,GT基因型待测大豆的分枝数大于TT基因型待测大豆。
7.下述X1)或X2)的应用:
X1)检测大豆分子标记的物质在鉴定或辅助鉴定大豆分枝数性状中的应用,所述大豆分子标记为以大豆基因组DNA为模板、采用引物对BRCH进行扩增得到的DNA分子,其序列为序列1或序列2;
X2)权利要求5所述的方法在鉴定或辅助鉴定大豆分枝数性状中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于:所述物质为引物对BRCH,所述引物对BRCH由名称为BRCH_F和BRCH_R的单链DNA组成,所述BRCH_F为序列1的第1-20位所示的单链DNA,所述BRCH_R为与序列1的第173-197位所示单链DNA反向互补的单链DNA。
9.大豆育种方法,包括:按照权利要求5所述的方法检测大豆的基因型,选择GG或TT或GT基因型的大豆作为亲本进行育种。
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