[发明专利]一种提高蛋白分泌效率的信号肽突变体及其应用有效
| 申请号： | 201710352661.4 | 申请日： | 2017-05-18 |
| 公开（公告）号： | CN107022005B | 公开（公告）日： | 2020-02-14 |
| 发明（设计）人： | 堵国成;刘龙;陈坚;李江华;邓琛 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C07K14/00 | 分类号： | C07K14/00;C12N15/11;C12N15/67;C12N1/21;C12N9/10;C12R1/19 |
| 代理公司： | 23211 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 | 代理人： | 张勇 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 信号肽 环糊精葡萄糖基转移酶 蛋白分泌 酶活 基因工程技术 外分泌蛋白 胞外表达 胞外分泌 常规蛋白 目的蛋白 能力增强 酪氨酸 突变体 重组菌 组氨酸 应用 改造 | ||
【权利要求书】：
1.一种信号肽突变体，其特征在于，氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.编码权利要求1所述信号肽突变体的基因。
3.一种携带权利要求1所述信号肽突变体的载体或细胞。
4.一种基因工程菌，其特征在于，大肠杆菌为宿主，表达连接有SEQ ID NO.1所示信号肽的CGT酶。
5.根据权利要求4所述的基因工程菌，其特征在于，所述CGT酶的基因序列如SEQ IDNO.4所示。
6.根据权利要求4所述的基因工程菌，其特征在于，所述大肠杆菌为E.coli BL21、E.coli BL21(DE3)、E.coli JM109、E.coli DH5α、E.coli TOP10中的任意一种。
7.根据权利要求4所述的基因工程菌，其特征在于，载体为pET-20b(+)或pET-28a(+)。
8.一种环糊精葡萄糖基转移酶的生产方法，其特征在于，所述方法是将权利要求4所述的基因工程菌接种至发酵培养基中，发酵至OD600为0.6～0.8，加入IPTG，诱导3～5d。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述基因工程菌为权利要求4所述的基因工程菌；所述诱导是培养温度为25℃～30℃，摇床转速220r/min，当菌体培养至OD600为0.6～0.8时，加入0.1～0.25mM IPTG后迅速转至不同温度的摇床，继续诱导80～100h。
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