[发明专利]一种微囊藻毒素降解菌的快速高效筛选方法

权利要求书

1.一种微囊藻毒素降解菌的快速高效筛选方法，其特征在于，包括以下步骤，

（1）设计如SEQ ID NO：1以及SEQ ID NO：2所述的引物对；

SEQ ID NO：1 : 5'-TGCGCTATGGGKCAGATCC-3'

SEQ ID NO：2:5'-GGTCAAACTTCTTGAGSAGCTG-3'

（2）以待筛选微囊藻毒素降解菌的DNA为模板，利用步骤（1）的引物对进行PCR扩增，得到扩增产物；

（3）检测步骤（2）的扩增产物，根据检测结果完成微囊藻毒素降解菌的筛选。

2.根据权利要求1所述微囊藻毒素降解菌的快速高效筛选方法，所述PCR扩增采用25µL反应体系，其中ddH₂O 17.2 µL，10×PCR缓冲液2.5 µL，dNTPs 溶液2 µL，引物溶液各1 µL，rTaq DNA聚合酶溶液0.3 µL，模板1 µL。

3.根据权利要求2所述微囊藻毒素降解菌的快速高效筛选方法，其特征在于，所述dNTPs溶液浓度为2.5 mM；所述引物溶液的浓度各为10 µM；所述rTaq DNA聚合酶溶液的浓度为5 U/µL。

4.根据权利要求1所述微囊藻毒素降解菌的快速高效筛选方法，其特征在于，所述PCR扩增反应条件为：94℃预变性10 min，94℃ 变性30 s，55℃ 退火30 s，72℃ 延伸30 s，共40个循环，最后72℃ 延伸5 min后，4℃ 保存。

5.根据权利要求1所述微囊藻毒素降解菌的快速高效筛选方法，其特征在于，检测步骤（2）的扩增产物为步骤（2）的扩增产物经电泳分离、染色、检测。

6.根据权利要求5所述微囊藻毒素降解菌的快速高效筛选方法，其特征在于，检测步骤（2）的扩增产物具体为步骤（2）的扩增产物经1%的琼脂糖凝胶电泳分离、EB 染色、紫外检测。

7.如SEQ ID NO：1以及SEQ ID NO：2所述的引物对；

SEQ ID NO：1 : 5'-TGCGCTATGGGKCAGATCC-3'

SEQ ID NO：2:5'-GGTCAAACTTCTTGAGSAGCTG-3'。

8.权利要求7所述的引物对在微囊藻毒素降解菌筛选中的应用。

9.一种微囊藻毒素降解的方法，其特征在于，包括以下步骤，

（1）设计如SEQ ID NO：1以及SEQ ID NO：2所述的引物对；

SEQ ID NO：1 : 5'-TGCGCTATGGGKCAGATCC-3'

SEQ ID NO：2:5'-GGTCAAACTTCTTGAGSAGCTG-3'

（2）以待筛选微囊藻毒素降解菌的DNA为模板，利用步骤（1）的引物对进行PCR扩增，得到扩增产物；

（3）检测步骤（2）的扩增产物，根据检测结果选择微囊藻毒素降解菌；

（4）用步骤（3）的微囊藻毒素降解菌降解微囊藻毒素。

10.根据权利要求9所述微囊藻毒素降解的方法，其特征在于，所述PCR扩增反应条件为：94℃预变性10 min，94℃ 变性30 s，55℃ 退火30 s，72℃ 延伸30 s，共40个循环，最后72℃ 延伸5 min后，4℃ 保存。