[发明专利]核酸扩增的精度管理方法、精度管理用试剂及其试剂盒

权利要求书

1.核酸扩增的精度管理方法，其包括核酸检测工序和判断工序，

上述核酸检测工序包括：

调制核酸样品的工序，所述核酸样品含目标核酸和精度管理用多核苷酸、

调制含上述目标核酸一分子的隔区和含上述精度管理用多核苷酸一分子的隔区的工序、

在上述各隔区中进行上述核酸样品中所含的上述目标核酸或上述精度管理用多核苷酸的核酸扩增，使检测用探针与上述目标核酸或上述精度管理用多核苷酸的扩增产物杂交，检测与上述目标核酸或上述精度管理用多核苷酸的扩增产物杂交的上述检测用探针引发的信号的工序，

在上述判断工序中，基于上述信号检测工序的结果，判断上述核酸检测工序适宜或不适宜，

上述目标核酸含检测序列，

上述精度管理用多核苷酸是以下的(1)、(2)或(3)：

(1)含以下第1区域、第2区域及第3区域的单链多核苷酸：

第1区域，其含能结合目标核酸扩增用的第1引物的序列；

第2区域，其含与能结合目标核酸扩增用的第2引物的序列互补的序列；及

第3区域，其含检测序列及与上述检测序列互补的序列的任一方、

(2)含与上述(1)的序列互补的序列的单链多核苷酸、

(3)含上述(1)的多核苷酸和上述(2)的多核苷酸的双链多核苷酸，

上述检测用探针含与上述检测序列互补的序列，

其中基于上述目标核酸的扩增产物的信号的强度和基于上述精度管理用多核苷酸的扩增产物的信号的强度不同，

上述隔区中所含的上述(1)的精度管理用多核苷酸一分子中的检测序列和与上述检测序列互补的序列的合计数与上述隔区中所含的上述目标核酸一分子中的检测序列的数不同，

其中在上述精度管理用多核苷酸中，上述第3区域位于上述第1区域和上述第2区域之间。

2.权利要求1所述的精度管理方法，其中上述各隔区还含上述第1引物、上述第2引物、dNTPs及聚合酶。

3.权利要求1所述的精度管理方法，其中上述精度管理用多核苷酸含DNA、RNA或多核苷酸衍生物。

4.权利要求1所述的精度管理方法，其中上述精度管理用多核苷酸是双链。

5.权利要求1所述的精度管理方法，其中

上述精度管理用多核苷酸

在上述第3区域的上游含第1间隔子序列，

在上述第3区域的下游含第2间隔子序列，

上述第1间隔子序列和上述第2间隔子序列是互相不同的序列，

上述第1间隔子序列和上述第2间隔子序列不互补。

6.权利要求1所述的精度管理方法，其中上述精度管理用多核苷酸中的检测序列和与上述检测序列互补的序列的合计数比上述目标核酸的检测序列的数多至少1个。

7.权利要求1所述的精度管理方法，其中上述检测用探针是用选自荧光物质、酶及半抗原的至少1种标记物质预先标记化的寡核苷酸。

8.权利要求7所述的精度管理方法，其中

上述核酸扩增在有外切核酸酶活性的聚合酶的存在下进行，

上述检测用探针是用荧光物质及猝灭剂物质预先标记化的寡核苷酸，在上述检测用探针中，上述猝灭剂物质以上述荧光物质消光方式配置，

上述检测用探针，在上述核酸扩增时，与上述目标核酸及精度管理用多核苷酸杂交，杂交的检测用探针由有上述外切核酸酶活性的聚合酶分解，上述荧光物质从上述猝灭剂物质隔离而发荧光信号变得可能。

9.权利要求2～8之任一项所述的精度管理方法，其中上述核酸样品含珠，

在上述珠上结合上述第1引物及上述第2引物的任一方或两方。

10.权利要求9所述的精度管理方法，其中上述隔区每1个隔区含1个上述珠。