[发明专利]一种与奶山羊产奶量性状相关的分子标记及其应用

说明书

本发明属于动物分子标记制备技术领域，具体涉及一种与奶山羊产奶量性状相关的分子标记的制备与应用。所述的分子标记由山羊H‑FABP基因克隆得到，它的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO.1所示，在序列表SEQ ID NO.1所示的第124位碱基处有一个A/C突变，该突变导致Sma Ⅰ‑PFLP多态性。本发明还公开了获得分子标记的制备方法及多态性检测方法的应用，为奶山羊的标记辅助选育提供了一个新的分子标记。

技术领域

本发明属于动物分子标记制备技术领域，具体涉及一种与奶山羊产奶量性状相关的分子标记的制备与应用。

背景技术

我国是奶山羊饲养量较多、分布范围较广的国家，奶山羊养殖业在20世纪60-80年代曾经是我国奶业的主导产业，90年代以后受到饲养规模小、乳品工业迅速膨胀等因素的影响，奶山羊生产发展迟缓。近十多年来，随着人民生活水平的不断提高和膳食结构改善的需求，人们对山羊奶营养价值和安全性的认同度有所改变，尤其是机器挤奶解决了规模化饲养的瓶颈问题，促进了全国奶山羊产业的复兴和发展。我国奶山羊品种是在二十世纪初由国外传教士带入的奶山羊品种与本地山羊杂交改良，又经过生态适应和系统选育而形成的，已经列入国家品种志或名录的有雅安奶山羊、崂山奶山羊、关中奶山羊和西农萨能奶山羊等。但由于饲养分散、规模较小等原因，我国奶山羊的遗传改良主要采用常规的育种手段，其泌乳性能遗传进展较为缓慢。

随着分子生物学技术的快速发展，分子标记辅助育种已成为动物遗传育种研究的热点和必然趋势。应用分子技术阐明奶山羊泌乳性状的调控机制，结合泌乳性状加强奶山羊的选育，必将大大加快奶山羊育种的进程。分子标记辅助育种技术的核心是寻找决定泌乳性状的主效基因及其分子标记。近年来，国内外学者对奶山羊产奶性状相关基因进行了一些研究，找到了一些功能基因和分子标记，但是有关产奶量性状的研究报道较少。

H-FABP基因与脂肪代谢相关。孙杰(2009)通过差异消减法鉴定到H-FABP基因在西农萨能奶山羊泌乳初期和盛期乳腺组织之间存在差异表达(孙杰，奶山羊乳腺消减文库构建及差异表达基因的研究，石河子大学2009年博士学位论文)，提示该基因可能在奶山羊泌乳过程中发挥重要的调控作用,可作为开发奶山羊分子育种标记的候选基因。本发明申请中克隆与奶山羊产奶量性状相关的H-FABP基因片段，并找到一个与奶山羊产奶量性状相关的突变位点，为奶山羊育种提供新的分子标记。

发明内容

本发明克隆了与奶山羊产奶量性状相关的H-FABP基因片段(该基因片段就是本发明制备的与奶山羊产奶量性状相关的分子标记)，并提供了与奶山羊产奶量性状相关的H-FABP基因片段的制备方法，该基因片段是通过设计特异性的引物，利用PCR扩增得到包括一个突变位点的H-FABP基因的片段，并且根据SmaⅠ-RFLP方法得到的不同酶切图谱确定不同的基因型。

本发明还提供了一种与奶山羊产奶量性状相关的H-FABP基因片段在奶山羊分子标记辅助选育中的应用。

具体地，本发明采用以下技术方案：

一、发明人通过基因克隆方法得到了一种与奶山羊产奶量性状相关的H-FABP基因单碱基突变片段(该基因片段就是本发明制备的与奶山羊产奶量性状相关的分子标记)，其核苷酸序列如下所示：

GGGACCAGGGGACGGATGTCGGTGGCCTGCGCCCCAGCTCGCGGGCACCGTGCCCCCAAC

TGCTTCCTTCTCAGATTCCGAAGAGCGCCTTGAGGCCAGGGAAGGGAGCAGGGCTTACCA

GCCMGGGGCAGGGACTCGGAGCCCGTGACCCGCGCTGACGTAGGCAAACTGGGTGC

上述序列124位突变位点的M是A或C，该突变导致SmaⅠ-RFLP多态性。