[发明专利]一种利用纳豆菌发酵制备玉米肽的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种微生物发酵技术，特别涉及一种利用纳豆菌发酵制备玉米肽的方法。

背景技术

木薯广泛栽培于热带与亚热带，是世界三大薯类之一。在我国热带地区，木薯是仅次于水稻、甘薯、甘蔗和玉米的第五大作物。木薯淀粉是平均链长度为23的支链淀粉，其颗粒呈球形或半球形，平均粒径为17～20μm。通过水解反应，木薯淀粉水解成含有醛基和羰基的淀粉糖，如葡萄糖、麦芽糖和低聚糖等。

木薯淀粉在点分行业常被用作碳源。除此之外，它还以原淀粉和各种变性淀粉两大类型广泛地应用在食品、饮料、糖果、胶粘剂和胶水、纺织、造纸、药品及化妆品和生物降解材料等方面。木薯的块根中含30%的淀粉，而木薯干含有70%的淀粉，有“淀粉之王”的美誉。由于木薯与其他农作物相比有不可比拟的优势：木薯的非粮食农产品，对土质的要求低，耐干旱、贫瘠，符合“不争粮、不争（食）油、不争糖，充分利用边际性土地（不适合种植粮、棉、油等作物的土地）”的国家粮食发展战略；成本低，具有经济性。因此，作为可再生的生物质资源，近年来，木薯淀粉在生物燃料的方面得到了广泛的应用与发展。

为减少高温耗能，降低水解成本，本发明选用中温型α-淀粉酶对木薯淀粉进行水解，并确定酶水解的最佳工艺条件，为木薯淀粉在生物燃料中的应用提供理论依据。

发明内容

本发明的目的是提供一种利用纳豆菌发酵制备玉米肽的方法，以玉米蛋白粉为基质，应用纳豆菌发酵法制备玉米肽，开发出玉米蛋白粉水解度高的方法。

为实现上述的目的，本发明采用的技术方案为：

步骤1：用接种环挑取豆菌一环，置于装有10mL无菌水的试管中充分混匀，制成悬浊液。取少量悬浊液，在斜面培养基平板上涂划线后，置培养箱中在35℃恒温条件下培养24h～45h，备用；

步骤2：从步骤1得到的斜面培养基平板上挑取菌种接入装有100mL种子培养基的三角瓶中，在37℃、180r/min的条件下，摇床振荡培养18h，制成107CFU/mL～108CFU/mL菌液，作为用于发酵玉米蛋白粉的纳豆菌种子液，备用；

步骤3：向玉米蛋白粉中加入水配置成浓度为0.05kg/L的底液，水浸泡24h后，120℃蒸煮10min，取出冷却至一定温度，即得玉米蛋白粉质量分数为5%的发酵原料，备用。

步骤4：取步骤3得到的质量分数为5%的发酵原料，接入步骤2得到的体积分数为3%的纳豆菌液，置于培养箱中，在一定40℃下发酵水解。达到72h后，取出置100℃水浴中加热10min灭酶，然后迅速冷却至室温，4000r/min离心10min得上清液，即蛋白水解液。

有益效果：以玉米蛋白粉为基质，应用纳豆菌发酵制备玉米肽，在此条件下发酵，玉米蛋白粉的水解度可达到11.17%，该方法工艺操作简单，成本低，市场前景良好，适于推广应用。

附图说明

无。

具体实施方式

为了使本发明的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。

我们采用本发明公开的方法，进行以下操作：

（1）用接种环挑取豆菌一环，置于装有10mL无菌水的试管中充分混匀，制成悬浊液。取少量悬浊液，在斜面培养基平板上涂划线后，置培养箱中在35℃恒温条件下培养24h～45h，备用；

（2）从（1）得到的斜面培养基平板上挑取菌种接入装有100mL种子培养基的三角瓶中，在37℃、180r/min的条件下，摇床振荡培养18h，制成107CFU/mL～108CFU/mL菌液，作为用于发酵玉米蛋白粉的纳豆菌种子液，备用；

（3）向玉米蛋白粉中加入水配置成浓度为0.05kg/L的底液，水浸泡24h后，120℃蒸煮10min，取出冷却至一定温度，即得玉米蛋白粉质量分数为5%的发酵原料，备用。

（4）取（3）得到的质量分数为5%的发酵原料，接入（2）得到的体积分数为3%的纳豆菌液，置于培养箱中，在一定40℃下发酵水解。达到72h后，取出置100℃水浴中加热10min灭酶，然后迅速冷却至室温，4000r/min离心10min得上清液，即蛋白水解液。

结果显示，以玉米蛋白粉为基质，应用纳豆菌发酵制备玉米肽，在此条件下发酵，玉米蛋白粉的水解度可达到11.17%。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的思想和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。