[发明专利]2,4-二氨基-6-蝶啶基甲基甲氨基苯甲酰-Glu-肽,其合成,活性和应用

说明书

本发明公开了下式的7种N‑[(4‑(2,4‑二氨基‑6‑蝶啶基甲基‑甲氨基)‑苯甲酰基]‑Glu‑Lys‑Glu‑R,公开了它们的制备方法,公开了它们对肿瘤生长和肿瘤转移的抑制作用,因而本发明公开了它们在制备抗肿瘤药物中的应用。

技术领域

本发明涉及7种N-[(4-(2,4-二氨基-6-蝶啶基甲基-甲氨基)-苯甲酰基]-Glu-Lys-Glu-R,涉及它们的制备方法,涉及它们对肿瘤生长的抑制作用,因而本发明涉及它们在制备抗肿瘤药物中的应用。本发明属于生物医药领域。

背景技术

甲氨蝶呤是抗代谢类抗肿瘤药物的代表，其能够有效的抑制二氢叶酸还原酶，干扰细胞核酸的代谢，从而达到杀死肿瘤细胞的目的。目前在急性淋巴白血病、淋巴瘤、恶性葡萄胎、鳞状上皮癌、绒毛癌、肺癌、乳腺癌、宫颈癌和成骨肉瘤等多种肿瘤的治疗上均发挥着重要的作用。甲氨蝶呤具有可口服，吸收良好。也可肌肉注射，血浆浓度维持较久等优点。但剂量高毒副作用明显。最常见的有骨髓移植、中枢神经系统损害、黏膜溃疡、肝肾作用损伤、胃肠损害、肺功能损害和皮肤损伤等。发明人对这种水平的活性不满意。于是，发明人开始了对甲氨蝶呤化学修饰。肿瘤的侵袭和转移是肿瘤的显著生物特征之一，同时也是临床中患者的主要死因。整合素家族是与肿瘤细胞转移相关的细胞粘附分子，细胞粘附分子要发挥作用，就要与其特定的配体结合。而配体上存在某些特定的氨基酸序列，重要的有-Lys-Glu,-Leu-Asp-Val,-Arg-Gly-Asp-Val,-Arg-Gly-Asp-Phe,-Arg-Gly-Asp-Ser,-Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg和-Leu-Pro-Asn-Ile-Ser-Lys-Pro等。人工合成的这些肽能够竞争性地与细胞粘附分子结合，从而在抗肿瘤的侵袭和转移的过程中发挥作用。经过长期实验研究，发明人发现用这些肽链修饰甲氨蝶呤，不仅有效剂量可降低至甲氨蝶呤的1/100，而且可抑制肿瘤侵袭和肺转移。这是意想不到的技术效果。根据这个发现，发明人提出了本发明。

发明内容

本发明的第一个内容是提供N-[(4-(2,4-二氨基-6-蝶啶基甲基-甲氨基)-苯甲酰基]-Glu-Lys-Glu-R，式中R选自-Lys-Glu,-Leu-Asp-Val,-Arg-Gly-Asp-Val,-Arg-Gly-Asp-Phe,-Arg-Gly-Asp-Ser,-Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg和-Leu-Pro-Asn-Ile-Ser-Lys-Pro。

本发明的第二个内容是提供N-[(4-(2,4-二氨基-6-蝶啶基甲基-甲氨基)-苯甲酰基]-Glu-Lys-Glu-R(式中R选自-Lys-Glu,-Leu-Asp-Val,-Arg-Gly-Asp-Val,-Arg-Gly-Asp-Phe,-Arg-Gly-Asp-Ser,-Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg和-Leu-Pro-Asn-Ile-Ser-Lys-Pro)的合成方法，该方法包括:

(1)在DCC、HOBt的催化下按标准方法制备Boc-Lys(Z)-Glu(OBzl)-OBzl；

(2)Boc-Lys(Z)-Glu(OBzl)-OBzl在4N的氯化氢-乙酸乙酯溶液中,0℃脱Boc，中转化成Lys(Z)-Glu(OBzl)-OBzl；

(3)在DCC、HOBt的催化下按标准方法制备Boc-Glu(OBzl)-Lys(Z)-Glu(OBzl)-OBzl；

(4)Boc-Glu(OBzl)-Lys(Z)-Glu(OBzl)-OBzl在4N的氯化氢-乙酸乙酯溶液中,0℃脱Boc，中转化成Glu(OBzl)-Lys(Z)-Glu(OBzl)-OBzl；

(5)在DCC、HOBt的催化下按标准方法制备Boc-Lys(Z)-Glu(OBzl)-Lys(Z)-Glu(OBzl)-OBzl；