[发明专利]酶法同时制备谷胱甘肽和腺苷酸的方法有效
申请号: | 201610167664.6 | 申请日: | 2016-03-22 |
公开(公告)号: | CN105603028B | 公开(公告)日: | 2019-04-16 |
发明(设计)人: | 刘珊珊;于铁妹;黄庆军;秦永发 | 申请(专利权)人: | 深圳市古特新生生物科技有限公司 |
主分类号: | C12P21/02 | 分类号: | C12P21/02;C12P19/32 |
代理公司: | 北京彭丽芳知识产权代理有限公司 11407 | 代理人: | 彭丽芳 |
地址: | 518103 广东省深圳市*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 同时 制备 谷胱甘肽 腺苷酸 方法 | ||
1.一种酶法同时制备谷胱甘肽和腺苷酸的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:
(1)在反应罐中生成谷胱甘肽GSH和AMP:
在反应罐中,100L无菌水的反应体系为含有底物2.8kg谷氨酸、1.8kg半胱氨酸和2.0kg甘氨酸,以及5.1kg ATP和0.83kg一水氯化锰的溶液,均匀搅拌;调节pH值至7.0,在反应体系中添加0.01kg GshF酶及0.001kg Adk酶开始反应,反应期间控制pH值为7.0,温度为37℃,反应时间6小时;
(2)在过滤器中分离GshF酶及Adk酶:
通过超滤方法,将步骤(1)的反应体系的反应液经过过滤器过滤分离GshF酶和Adk酶,过滤,滤出液为分离出酶之后的反应液;
(3)分离产物GSH和AMP:
使用盐酸调节滤出液的pH值至3.0,在离子交换柱中通过D001大孔强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂,溶液中的GSH、部分氨基酸及阳离子被吸附,穿出液中主要含有AMP,可简单脱盐后直接浓缩结晶;
使用0-0.8M NaCl梯度洗脱阳离子交换树脂上的GSH;
(4)反应罐生成GSH和AMP的连续反应,即步骤(1)的连续反应:
将步骤(2)中分离出的酶经由过滤器的回流口添加至反应罐,并添加原酶量5-15%的新酶进行反应;
在37℃、pH为7.0的条件下进行生成GSH和AMP的连续反应,反应时间6小时。
2.根据权利要求1所述的酶法同时制备谷胱甘肽和腺苷酸的方法,其特征在于,所述步骤(4)反应中反应液配制方法与步骤(1)相同。
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