[发明专利]酶法同时制备谷胱甘肽和腺苷酸的方法有效

专利信息
申请号: 201610167664.6 申请日: 2016-03-22
公开(公告)号: CN105603028B 公开(公告)日: 2019-04-16
发明(设计)人: 刘珊珊;于铁妹;黄庆军;秦永发 申请(专利权)人: 深圳市古特新生生物科技有限公司
主分类号: C12P21/02 分类号: C12P21/02;C12P19/32
代理公司: 北京彭丽芳知识产权代理有限公司 11407 代理人: 彭丽芳
地址: 518103 广东省深圳市*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 同时 制备 谷胱甘肽 腺苷酸 方法
【权利要求书】:

1.一种酶法同时制备谷胱甘肽和腺苷酸的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:

(1)在反应罐中生成谷胱甘肽GSH和AMP:

在反应罐中,100L无菌水的反应体系为含有底物2.8kg谷氨酸、1.8kg半胱氨酸和2.0kg甘氨酸,以及5.1kg ATP和0.83kg一水氯化锰的溶液,均匀搅拌;调节pH值至7.0,在反应体系中添加0.01kg GshF酶及0.001kg Adk酶开始反应,反应期间控制pH值为7.0,温度为37℃,反应时间6小时;

(2)在过滤器中分离GshF酶及Adk酶:

通过超滤方法,将步骤(1)的反应体系的反应液经过过滤器过滤分离GshF酶和Adk酶,过滤,滤出液为分离出酶之后的反应液;

(3)分离产物GSH和AMP:

使用盐酸调节滤出液的pH值至3.0,在离子交换柱中通过D001大孔强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂,溶液中的GSH、部分氨基酸及阳离子被吸附,穿出液中主要含有AMP,可简单脱盐后直接浓缩结晶;

使用0-0.8M NaCl梯度洗脱阳离子交换树脂上的GSH;

(4)反应罐生成GSH和AMP的连续反应,即步骤(1)的连续反应:

将步骤(2)中分离出的酶经由过滤器的回流口添加至反应罐,并添加原酶量5-15%的新酶进行反应;

在37℃、pH为7.0的条件下进行生成GSH和AMP的连续反应,反应时间6小时。

2.根据权利要求1所述的酶法同时制备谷胱甘肽和腺苷酸的方法,其特征在于,所述步骤(4)反应中反应液配制方法与步骤(1)相同。

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