[发明专利]一株不依赖于甲硫氨酸的头孢菌素高产基因工程菌株的构建及其应用有效
| 申请号： | 201610069350.2 | 申请日： | 2016-02-01 |
| 公开（公告）号： | CN105524849B | 公开（公告）日： | 2019-02-12 |
| 发明（设计）人： | 刘钢;刘佳佳 | 申请（专利权）人： | 中国科学院微生物研究所 |
| 主分类号： | C12N1/15 | 分类号： | C12N1/15;C12P35/06;C12N9/10;C12N15/54;C12R1/645 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅;白艳 |
| 地址： | 100101 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一株不 依赖于 甲硫氨酸 头孢菌素 高产 基因工程 菌株 构建 及其 应用 | ||
1.一种重组顶头孢霉菌，为抑制顶头孢霉菌基因组上的Acppm1蛋白活性，得到的重组菌；
所述Acppm1蛋白是序列表中序列2所示的蛋白质。
2.根据权利要求1所述的重组菌，其特征在于：所述抑制顶头孢霉菌基因组上的Acppm1蛋白活性为敲除所述顶头孢霉菌基因组上的Acppm1蛋白编码基因。
3.根据权利要求2所述的重组菌，其特征在于：所述敲除所述顶头孢霉菌基因组上的Acppm1蛋白编码基因为将顶头孢霉菌基因组上的Acppm1蛋白编码基因替换为标记基因；
所述Acppm1蛋白编码基因的核苷酸序列为序列表中序列1。
4.根据权利要求3所述的重组菌，其特征在于：所述标记基因为潮霉素B编码基因。
5.根据权利要求1-4中任一所述的重组菌，其特征在于：所述重组菌的保藏编号为CGMCC NO.12103。
6.一种产生头孢菌素的方法，包括如下步骤：在甲硫氨酸缺失体系中发酵权利要求1-5任一所述的重组菌，得到头孢菌素。
7.抑制Acppm1蛋白编码基因表达的物质，其为用于同源重组的DNA分子，所述用于同源重组的DNA分子包括Acppm1蛋白编码基因上游同源臂、标记基因和Acppm1蛋白编码下游同源臂；
所述Acppm1蛋白编码基因上游同源臂的核苷酸序列为序列表中序列3；
所述Acppm1蛋白编码基因下游同源臂的核苷酸序列为序列表中序列4。
8.权利要求7所述的物质在调控顶头孢霉菌在甲硫氨酸缺失条件下产生头孢菌素的量中的应用；
或抑制Acppm1蛋白在提高顶头孢霉菌在甲硫氨酸缺失条件下产生头孢菌素的量中的应用；
或权利要求1-5任一所述的重组菌在生产头孢菌素中的应用。
9.权利要求1-5任一所述的重组菌在提高头孢菌素产量中的应用。
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