[发明专利]一种人乳头瘤病毒荧光定量PCR检测试剂盒及其使用方法

权利要求书

1.一种人乳头瘤病毒荧光定量PCR检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒包括PCR反应液，且所述PCR反应液包括PCR缓冲液、脱氧核糖核苷三磷酸、用于扩增靶多核苷酸的上下游引物和用于检测靶多核苷酸的探针；

所述用于检测靶多核苷酸的探针为HPYG1-P1、HPYG1-P2、HPYG1-P3、HPYG2-P、HPYG2-P1、HPYG3-P1、HPYG3-P2、HPYG4-CY5和HPYG5-ROX的序列；其中，

用于检测HPV16、31、35、33、52、58的HPYG1-P1、HPYG1-P2、HPYG1-P3的序列分别为：

HPYG1-P1：TCCTCGTGCAAACTTAATCTGCACCAC-FAM；

HPYG1-P2：TTCCTCTATTAAACCTAATTTGCACCACGT-FAM；

HPYG1-P3：CTCGTGCAAACTTAATCTGGACCACG-FAM；

用于检测HPV18、45、59、39、68的HPYG2-P、HPYG2-P1的序列分别为：

HPYG2-P：TCCCCTCCCCATCTGTACCTTC-FAM；

HPYG2-P1：ACCCATCCCCGTCTGTACCTTC-FAM；

用于检测HPV51、53、56、66的HPYG3-P1、HPYG3-P2的序列分别为：

HPYG3-P1：TCATCCTCATCCTCTGAGCTGTCCAA-FAM；

HPYG3-P2：TCATCCTCCTCCTCTGAGCTGTCAAA-FAM；

用于检测HPV16的HPYG4-CY5序列为：CCACAGTTATGCACAGAGCTGCAAACAAC-CY5；

用于检测HPV18的HPYG5-ROX序列为：AATCATCAACATTTACCAGCCCGACG-ROX；

所述用于扩增靶多核苷酸的上下游引物为HPYG1-F、HPYG1-R1、HPYG1-R2、HPYG2-F、HPYG2-R1、HPYG2-R2、HPYG3-F1、HPYG3-F2、HPYG3-R1、HPYG3-R2、HPYG4-F、HPYG4-R、HPYG5-F和HPYG5-R的序列；其中，

HPYG1-F的序列为AACTGGAAATCCTTTTTCTCAAGG；

HPYG1-R1的序列为CTCCATCGTTTTCCTTGTCCTC；

HPYG1-R2的序列为CTCCATCGTTTTCTTTGTCCTC；

HPYG2-F的序列为TTTGTGTGTCCGTGGTGTGC；

HPYG2-R1的序列为AACCAGCCATTACAACCCG；

HPYG2-R2的序列为AACCATCCGTTACAACCCG；

HPYG3-F1的序列为GACCTGCAATGCAATGAGCAA；

HPYG3-F2的序列为GACTTGCAATGCTACGAGCAA；

HPYG3-R1的序列为CTCCTGCAAATGGTCTACTTCATC；

HPYG3-R2的序列为GGTAGCTGGTCACGCATATTATCTAC；

HPYG4-F的序列为CACAGGAGCCACCCAGAAAG；

HPYG4-R的序列为GTCATATACCTCACGTCGCAGTAAC；

HPYG5-F的序列为TCAGAGGAAGAAAACGATGAAATAG；

HPYG5-R的序列为CTGGCTTCACACTTACAACACATAC。

2.根据权利要求1所述的人乳头瘤病毒荧光定量PCR检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒还包括内标，所述内标为β-球蛋白；

所述PCR反应液还包括用于检测内标的探针，所述检测内标的探针为GB-P的序列；

所述PCR反应液还包括用于扩增内标的上游引物以及下游引物；所述上下游引物为GB-F、GB-R序列；其中，

GB-P序列为CATGGTGCACCTGACTCCTGAGGAG-HEX；

GB-F序列为GTGTTCACTAGCAACCTCAAACAGA；

GB-R序列为ACGTTCACCTTGCCCCACA。