[发明专利]一种酵母菌富集铜离子的驯化培养和检测方法

说明书

本发明涉及一种酵母菌富集铜离子的驯化培养和检测方法；驯化培养方法为首先配制不同铜离子浓度驯化培养基和基础培养基；将所培养的产朊假丝酵母种子液，接种到不同铜离子浓度驯化培养基中，摇床培养；选择所培养的菌液中OD600值高，上清液中铜离子的含量较低的产朊假丝酵母菌作为出发菌种；取出发菌种菌液，接种到最低含铜离子的浓度为的驯化培养基中，摇瓶培养后，再吸取菌液接种到浓度为次低的驯化培养基中，按照此方法，接种培养；最后检测不同代次产朊假丝酵母的铜离子转化率，当铜离子的转化率不变或降低时，该菌种即为富铜酵母生产菌种。本发明所培养的酵母菌可在高铜离子浓度培养基中生长，对铜离子的转化效率高，为酵母新功能开发提供基础。

技术领域

本发明涉及一种酵母菌培养方法，具体的说是一种酵母菌富集铜离子的驯化培养和检测方法。

背景技术

随着我国经济的飞速发展和人民生活水平的不断提高，对肉、蛋、奶、皮、毛、羽等畜产品的需求与日俱增。这导致了我国畜牧业的飞速发展，养殖种类增加，养殖规模加大，饲料在养殖业中所占的成本比例和产值也在不断扩大。2013年，全国商品饲料总产量1.934亿吨(产值6784亿元)，已经成为国民经济的支柱产业。微量金属元素是动物体必不可少的营养物质，参与多种代谢途径。然而，最初的微量元素都是以无机盐的形式添加，在动物体内的转化效率低，大部分随粪便排到环境当中，严重污染环境。大剂量的无机盐添加还会影响到饲料的适口性，使动物的采食量降低。

酵母是一种单细胞真菌，细胞个体大，且酵母富含维生素、酶、寡糖等营养物质，被列为单细胞蛋白饲料的范围内。在对酵母研究的一系列成果中均证明，酵母在自身代谢过程中能够利用多种微量元素转化为自身成分，或者与酵母体内氨基酸结合变成金属元素氨基酸螯合物，这种形式存在的金属元素在动物体内能够与氨基酸一起直接被消化道上皮细胞吸收，大大提高了生物学效价，降低了金属离子的使用量。同时酵母培养简单，培养成本低，本方案采用无机铜离子（硫酸铜）作为铜源，培养和驯化酵母，然后作为动物饲料使用，既可以降低养殖业无机铜的使用，减少环境污染；又能够提供酵母蛋白，改善饲料品质。

现有的发明专利如：专利201210595217采用酵母菌液态发酵法将无机铜硫酸铜转化为有机酵母铜，所涉及的菌株为酿酒酵母CGMCC-6438，该发明所生产的产品铜含量可达21.47mg/g风干菌体重，产量可达16.05g/L风干菌体。专利200910066547提供一种酵母铜、酵母铁和酵母锌复合仔猪饲料添加剂，由酵母铜、酵母铁和酵母锌组成。该发明相对于现有饲料具有的优点在于：通过添加酵母铜、酵母铁、酵母锌，既减少铜、铁和锌的添加量，又可避免微量元素铜、铁和锌之间的颉颃作用，提高仔猪的生长性能、增强仔猪的抗氧化作用和免疫功能以及预防疾病的优点。这两个专利技术前者主要是利用酿酒酵母生产酿酒酵母铜产品，最终以产品形式体现，所用菌种也局限在了酿酒酵母，没有形成富铜酵母培养和驯化的系统方法。后者主要是一种简单的有机微量元素复配，重点是作为有机微量元素添加剂产品，也没有体现酵母对铜离子的耐受力和如何培养驯化的方法。

发明内容

本发明目的是为解决上述技术问题的不足，提供一种酵母菌富集铜离子的驯化培养和检测方法，所培养的酵母菌在250ug/mL的铜离子浓度培养基中正常生长，对铜离子的转化效率达到95.6%，为酵母新功能开发提供基础。

一种酵母菌富集铜离子的驯化培养方法，包括以下步骤：