[发明专利]纯化方法和组合物

说明书

发明领域

本发明涉及用于体内成像的放射性药物领域，具体地说涉及纯化包含¹⁸F标记的氨氧基官能化生物打靶部分的放射性示踪剂的方法。本发明提供含有辐射防护剂的示踪剂的放射性药物组合物以及相关自动化方法和盒。

发明背景

WO 2004/080492 A1公开了用于生物打靶载体的放射性氟化的方法，所述方法包括使式(I)的化合物与式(II)的化合物反应：

或，

使式(III)的化合物与式(IV)的化合物反应

其中：

R1为醛部分、酮部分、被保护的醛例如乙缩醛、被保护的酮例如缩酮或使用氧化剂可被快速且有效氧化成醛或酮的官能团，例如二醇或N-端丝氨酸残基；

R2是选自伯胺、仲胺、羟胺、肼、酰肼、氨氧基、苯肼、氨基脲和氨基硫脲的基团；

R3是选自伯胺、仲胺、羟胺、肼、酰肼、氨氧基、苯肼、氨基脲或氨基硫脲的基团；

R4为醛部分、酮部分、被保护的醛例如乙缩醛、被保护的酮例如缩酮或使用氧化剂可被快速且有效氧化成醛或酮的官能团，例如二醇或N-端丝氨酸残基；

分别得到式(V)或(VI)的缀合物：

其中X为-CO-NH-、-NH-、-O-、-NHCONH-或-NHCSNH-，且优选为-CO-NH-、-NH-或-O-；Y为H、烷基或芳基取代基；和

式(II)、(IV)、(V)和(VI)的化合物中的接头基团选自：

其中：

n为0-20的整数；

m为1-10的整数；

p为0或1的整数；

Z为O或S。

Poethko等[J. Nucl. Med., 45(5), 892-902 (2004)]公开了用放射性同位素¹⁸F对肽进行放射性标记的方法，其中氨氧基官能化肽与[¹⁸F]-氟苯甲醛缩合得到具有如下肟醚键的标记的肽：

Schottelius等[Bioconj. Chem., 19(6), 1256-1268 (2008)]进一步发展了Poethko等人的方法。Schottelius等人使用氨氧基官能化肽，其中氨氧基的胺被N-Boc (Boc =叔丁氧基羰基)保护基保护。在[¹⁸F]-氟苯甲醛存在下通过N-Boc基团在酸性pH (pH = 2)、75℃下脱保护，原位产生所需的氨氧基官能化肽。Schottelius等人使用5倍摩尔过量的Boc保护的前体，因为脱保护在此反应条件下不是定量的。

Mezo等[J. Pept. Sci., 17, 39-46 (2010)]描述了与Boc保护的氨氧基官能化肽的上述肟连接化学有关的一些问题。因此，已知Boc-氨氧基试剂可使所形成的Boc保护的氨氧基-肽酰化，产生不需要的副产品。还已知官能化肽的游离氨氧基对羰基化合物的反应性高。因此，可随存在于反应混合物或任何后续纯化步骤中的任何外来的醛或酮发生不需要的缩合。这类醛或酮可以是存在于所用溶剂中的痕量的丙酮，或甲醛(例如来自可塑剂)。Mezo等人对解决此问题以用于抗癌药物和[¹⁸F]-氟苯甲醛与肽的缀合两者产生兴趣。Mezo等人通过在10倍摩尔过量的作为“羰基俘获剂”的游离(氨氧基)乙酸(Aoa)存在下进行Boc-氨氧基肽的脱保护，解决了这个问题。然后使脱保护的氨氧基-肽和过量的Aoa冻干并保存在4℃下。临在肟连接反应之前，使冻干的混合物复溶，并通过HPLC或Sep-Pak plus C18柱体分离过量的Aoa。Mezo等人提供其中采用该技术使非放射性(即¹⁹F) 4-氟苯甲醛与氨氧基官能化促生长素抑制素肽缀合的实例。Mezo等人未提供有关¹⁸F-放射性标记的任何数据。

WO 2012/022676公开了包含下式I的¹⁸F-放射性标记的18-30聚体c-Met结合环肽的成像剂：

Z¹-[cMBP]-Z²　　(I)

其中：

cMBP为下式II：