[发明专利]具有抗氧化作用的啤酒酵母多肽及其制备方法有效
申请号: | 201410829447.X | 申请日: | 2014-12-25 |
公开(公告)号: | CN104498575B | 公开(公告)日: | 2017-11-28 |
发明(设计)人: | 刘立国;王倩 | 申请(专利权)人: | 广州优锐生物科技有限公司 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C12R1/865 |
代理公司: | 广州华进联合专利商标代理有限公司44224 | 代理人: | 李海恬,万志香 |
地址: | 510663 广东省广州市广州高新*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 具有 氧化 作用 啤酒 酵母 多肽 及其 制备 方法 | ||
技术领域
本发明涉及发酵领域,特别是涉及一种具有抗氧化作用的啤酒酵母多肽及其制备方法。
背景技术
啤酒酿制过程中的废弃物主要是啤酒糟和废酵母,其具有多种营养成分并易于提取,在食品工业、饲料工业和制药工业中有广泛应用。啤酒废弃物可以用于生产酵母浸膏、营养调味品、胞壁多糖、面包饼干等营养食品;在饲料工业上可以作为鱼虾饲料,生产发酵饲料及粗酶制剂;在医药上可作为提取SOD、FDP、RNA、葡聚糖及制取酒花素和复合磷酸酯酶等物质的好材料。啤酒废弃物的回收利用具有非常广阔的应用前景,具有较好的社会效益和经济效益。
而其中,啤酒废酵母有极高的利用价值,其含有6%~8%的核糖核酸,2%的B族维生素,1%的谷胱甘肽及辅酶A,还有人体必需的8种氨基酸,更值得关注的是,其含有50%左右的蛋白质,然而,关于利用啤酒废酵母制备功能多肽却鲜有研究。
发明内容
基于此,本发明的目的在于提供一种具有抗氧化作用的啤酒酵母多肽的制备方法。
解决上述技术问题的具体技术方案如下:
一种具有抗氧化作用的啤酒酵母多肽的制备方法,包括如下步骤:
(1)配制酶悬浮液:将中性蛋白酶和木瓜蛋白酶溶于磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液中,制成pH为7.2-7.8的酶悬浮液;所述中性蛋白酶和木瓜蛋白酶的重量份配比为0.9-1.1:0.9-1.1;
(2)将废啤酒酵母粉碎,置于反应釜中,加磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液,得蛋白浓度为1-1.8%的啤酒酵母溶液;
(3)于啤酒酵母溶液中加酶悬浮液进行酶解,得酶解液;所述酶解的温度为55-60℃,时间为3-4h,pH为5-6;所述酶悬浮液的添加量为:按啤酒酵母溶液中蛋白和酶悬浮液中酶的重量计,每100g蛋白中添加5-7g酶;
(4)灭酶活,并将灭酶活后的酶解液于转速为3000-5000r/min离心12-17min,取上清液,干燥,即可。
在其中一些实施例中,步骤(3)中所述酶解的温度为57-58℃,时间为3.4-3.6h,pH为5.3-5.5。
在其中一些实施例中,步骤(3)中所述酶悬浮液的添加量为:按啤酒酵母溶液中蛋白和酶悬浮液中酶的重量计,每100g蛋白中添加5.9-6.1g酶。
在其中一些实施例中,步骤(4)中所述转速为3800-4200r/min。
在其中一些实施例中,步骤(1)中所述酶悬浮液的pH为7.5。
在其中一些实施例中,步骤(2)中所述啤酒酵母溶液的蛋白浓度为1.33-1.35%。
在其中一些实施例中,步骤(4)中所述干燥的温度为110-130℃,时间为22-26h。
在其中一些实施例中,步骤(4)中所述灭酶活的方法为:调节酶解液的pH至3.9-4.1,温度至89-91℃,保温18-22min。
在其中一些实施例中,步骤(4)中采用3.9-4.1mol/L的盐酸溶液调节酶解液的pH。
本发明的另一目的在于提供一种上述制备方法制得的具有抗氧化作用的啤酒酵母多肽。
本发明所述的种具有抗氧化作用的啤酒酵母多肽及其制备方法具有以下优点和有益效果:
本发明经发明人大量的实验和研究,得出:将中性蛋白酶和木瓜蛋白酶以特定配比复合,溶于磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液,制得酶悬浮液,将该酶液添加于啤酒废酵母溶液进行酶解,通过严格控制酶解条件进而制得具有良好的抗氧化作用的多肽;该方法使啤酒废酵母变废为宝,且简单易操作,适合大规模生产。
具体实施方式
以下将结合具体实施例对本发明做进一步说明。
下述实施例中所述磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液的配制方法为:取68.05g溶解于3500ml溶液蒸馏水中,用1M氢氧化钠溶液将pH值调至7.0,并定容至5000ml。
所述水解度的测定方法,采用PH-Star法:
水解度(DH)=被水解的肽键的数目/总的肽键的数目
=VNaOH×1/A×CNaOH/Mp×1/Htot
式中V:水解过程中用去的NaOH的量(g);
MP:蛋白质的总量(g);
C:NaOH的浓度(mol/L);
Htot:每克蛋白质中肽键的克当量(取8.38);
A:a-氨基酸的解离度。
实施例1
本实施例中一种具有抗氧化作用的啤酒酵母多肽的制备方法,包括如下步骤:
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