[发明专利]一种具有抑制α-葡萄糖苷酶活性的汉麻籽粕多肽及其酶解制备方法与应用在审
申请号: | 201410374772.1 | 申请日: | 2014-07-31 |
公开(公告)号: | CN104131059A | 公开(公告)日: | 2014-11-05 |
发明(设计)人: | 吴晖;任尧;梁凯 | 申请(专利权)人: | 华南理工大学 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K1/16;A23L1/29 |
代理公司: | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人: | 何淑珍 |
地址: | 511400 广东省广州市*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 具有 抑制 葡萄 糖苷酶 活性 汉麻籽粕 多肽 及其 制备 方法 应用 | ||
1. 一种具有抑制α-葡萄糖苷酶活性的汉麻籽粕多肽的酶解制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)取汉麻籽粕干燥,粉碎成细粉;加水溶解,干粉与水的比例为5~20g:100 mL,pH调至8.0~10.5,温度调至30~80℃,以100~300r/min的速度均匀搅拌0.5h~2h以加速溶解,取上清液调pH至3~6,离心,将沉淀冷冻干燥,制得汉麻籽粕蛋白;
(2)将汉麻籽粕蛋白加水溶解,比例为2~7g:100 mL,控制pH值在7.5~9.5,再加入碱性蛋白酶为生物催化剂,反应温度为50~75℃,以100~300 r/min匀速搅拌1~4h;煮沸10min,灭酶活,结束反应;10000r/min离心,收集上清液,过大孔吸附树脂和葡聚糖凝胶,以水洗脱,收集洗脱液,富集洗脱下来的高活性多肽组分,浓缩,干燥,得汉麻籽粕多肽粉末。
2. 根据权利要求1所述的具有抑制α-葡萄糖苷酶活性的汉麻籽粕多肽的酶解制备方法,其特征在于:所述的汉麻品种为汉麻Cannabis sativa L.。
3. 根据权利要求1所述的具有抑制α-葡萄糖苷酶活性的汉麻籽粕多肽的酶解制备方法,其特征在于:所述取汉麻籽粕干燥中干燥具体为:干燥至汉麻籽粕的含水量小于3%。
4. 根据权利要求1所述的具有抑制α-葡萄糖苷酶活性的汉麻籽粕多肽的酶解制备方法,其特征在于:所述碱性蛋白酶为Alcalase2.4L,酶的活力为393235 U/g。
5. 根据权利要求1所述的具有抑制α-葡萄糖苷酶活性的汉麻籽粕多肽的酶解制备方法,其特征在于:制备过程中,用1mol/L的氢氧化钠(NaOH)溶液将pH调至8.0~10.5,用1mol/L的盐酸(HCl)溶液将pH调至3~6。
6. 根据权利要求1所述的具有抑制α-葡萄糖苷酶活性的汉麻籽粕多肽的酶解制备方法,其特征在于:汉麻籽粕蛋白重量与碱性蛋白酶酶活之比0.1~5:1000。
7. 根据权利要求1所述的具有抑制α-葡萄糖苷酶活性的汉麻籽粕多肽的酶解制备方法,其特征在于:分离纯化所用大孔吸附树脂类型为DA201-C,将75%乙醇洗脱组分收集,冷冻干燥;所述过大孔吸附树脂具体为:将上清液倒入DA201-C大孔吸附树脂交换柱,以0~100%不同浓度乙醇溶液梯度洗脱,在波长214 nm处测定吸光度,富集75%乙醇洗脱下来小肽组分。
8. 根据权利要求1所述的具有抑制α-葡萄糖苷酶活性的汉麻籽粕多肽的酶解制备方法,其特征在于:分离纯化所用葡聚糖凝胶类型为Sephadex G-15,收集第4洗脱组分,冷冻干燥。
9.由权利要求1-8所述制备方法制备得到一种具有抑制α-葡萄糖苷酶活性的汉麻籽粕多肽,其特征在于,所述汉麻多肽的分子量范围为<1000 Da。
10.权利要求9所述的一种具有抑制α-葡萄糖苷酶活性的汉麻籽粕多肽应用于制备具有α-葡萄糖苷酶抑制活性功效的降血糖功能性食品,所述功能性食品为粉剂、片剂、口服液或胶囊。
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