[发明专利]一种利用乳酸菌静息细胞发酵生产γ-氨基丁酸工艺

权利要求书

1.一种利用乳酸菌静息细胞发酵生产γ-氨基丁酸工艺，其特征包括以下步骤：

(1)静息细胞获取：将具有γ-氨基丁酸转化能力的乳酸菌株从斜面培养基上接种于含有诱导剂-谷氨酸钠（MSG）的改良MRS培养基, 30-40℃培养20-40h，12000rmp，4^oC低温离心收集菌体，用柠檬酸缓冲液冲洗3遍后备用;

所说的斜面培养基为：蛋白胨(5-10g/L)、牛肉膏(5-10g/L)、酵母粉(10-20 g/L)、葡萄糖(10-20 g/L)、乙酸钠(2.5-5 g/L)、磷酸氢二钾(0.5-2 g/L)、柠檬酸二胺(0.5-1 g/L)、吐温0.1 g/L、硫酸镁0.2 g/L、硫酸锰0.05 g/L、琼脂粉18g/L,pH为6.0-8.0;

所说的改良MRS培养基为：蛋白胨(5-10g/L)、牛肉膏(5-10g/L)、酵母粉(10-20 g/L)、葡萄糖(10-20 g/L)、乙酸钠(2.5-5 g/L)、磷酸氢二钾(0.5-2 g/L)、柠檬酸二胺(0.5-1g/L)、吐温0.1 g/L、硫酸镁0.2 g/L、硫酸锰0.05 g/L,pH为6.0-8.0;

所说的柠檬酸缓冲液为：0.2M柠檬酸缓冲液;

(2)将活性乳酸菌静息细胞分散于转化缓冲液中，于30-40℃，100rmp孵育3-5h，完成转化,静息细胞在缓冲液中的浓度为OD₆₀₀值为1.0-8.0;

所说的转化缓冲液为0.2-0.4M的柠檬酸缓冲液，并含有60-200mM的转化底物MSG，乙醇0.5%-2%（v/v）,pH为3.0-6.0。