[发明专利]一种液体硫乙醇酸盐培养基及其应用

说明书

技术领域    

    本发明为微生物领域，特别涉及一种液体硫乙醇酸盐培养基及其应用。

背景技术    

    产气荚膜梭菌（C.perfringens) 是临床上气性坏疽病原菌中最多见的一种梭菌，因能分解肌肉和结缔组织中的糖，产生大量气体，导致组织严重气肿，继而影响血液供应，造成组织大面积坏死，加之本菌在体内能形成荚膜，故名产气夹膜梭菌。

    肉毒杆菌是一种生长在缺氧环境下的细菌，在罐头食品及密封腌渍食物中具有极强的生存能力，是毒性最强的毒素之一。肉毒杆菌是一种致命病菌，在繁殖过程中分泌毒素，是毒性最强的蛋白质之一。军队常常将这种毒素用于生化武器。人们食入和吸收这种毒素后，神经系统将遭到破坏，出现头晕、呼吸困难和肌肉乏力等症状。

培养基（Medium）是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）以及维生素和水等。有的培养基还含有抗菌素和色素，用于单种微生物培养和鉴定。培养基由于配制的原料不同，使用要求不同，而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后，易被细菌污染或分解变质，因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基（如组织培养基），较长时间的贮存，必须放在3~6℃的冰箱内。由于液体培养基不易长期保管，现在均改制成粉末。

培养基根据化学分类为天然培养基、组合培养基和半组合培养基；根据物理分类为液体培养基、固定培养基和脱水培养基；根据微生物分类为选择性培养基、鉴别培养基。

发明内容

     本发明克服现有技术中的不足，提供一种液体硫乙醇酸盐培养基及其应用。

     本发明运用生物化学，微生物学及无机、有机、分析化学和荧光技术的原理，对不同的碳源、氮源、无机盐类、维生素、生长促进剂等诸类营养组分的组合进行筛选，对培养基的pH值、离子强度、氧化-还原电势、表面张力、气体环境等物化因子进行了比较，研究出了本发明的培养基。

     本发明所采用的技术方案为：

    一种液体硫乙醇酸盐培养基，所述培养基的组分包括30.1g/L 疱肉培养基、2.4g/L乳糖、0.88g/L硫乙醇酸钠、0.68g/L L-胱氨酸 、0.05g/L磷酸二氢钾、 3.5g/L氯化钠 、0.001g/L 刃天青、0.76g/L 琼脂，pH值为6.9-7.3。

    在以上方案的基础上，所述疱肉培养基为每升疱肉培养基中含有酪胨20.0g、酵母浸粉5.0g、可溶性淀粉 1.5g、葡萄糖3g、枸橼酸钠5.8g、去氧胆酸钠0.33g、磷酸二氢钠2.0g。

     本发明还公开了所述的液体硫乙醇酸盐培养基的应用，用于产气荚膜梭菌确证试验的细菌培养。

酪胨和酵母出粉提供碳氮源、维生素和生长因子；葡萄糖提供可发酵有糖类更利于生长；氯化钠维持均衡的渗透压；硫乙醇酸钠和L—胱氨酸能有效降低氧化还原电位，防止过氧化物的积累对某些菌产生毒性，同时其硫氢基团有钝化含砷、汞及其它重金属防腐剂的抑菌作用；少量琼脂的凝固作用可防止二氧化碳、氧气和还原产物的扩散；刃天青是氧化还原指示剂，氧化状态呈粉红色，还原状态无色。

 称取本品 29.25g，加热搅拌溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装适宜容器，其装量与容器高度的比例应符合，培养结束后培养基氧化层（粉红色）不超过培养基深度的1/2。121℃高压灭菌 15分钟迅速冷却。

在接种前，培养基氧化层高度不得超过培养基深度的1/5 。否则，须经100℃水浴加热至粉红色消失（不得超过20分钟），迅速冷却，只限加热一次，并应防止被污染。   

      本发明的有益效果：

      1、培养基组方简单，制备操作方便，成本低，利于推广应用；

      2、菌生长迅速，变异率低；

      3、便于观察，分析。

具体实施方式   

实施例1：

    一种液体硫乙醇酸盐培养基，所述培养基的组分包括30.1g/L 疱肉培养基、2.4g/L乳糖、0.88g/L硫乙醇酸钠、0.68g/L L-胱氨酸 、0.05g/L磷酸二氢钾、 3.5g/L氯化钠 、0.001g/L 刃天青、0.76g/L 琼脂，pH值为6.9-7.3。