[发明专利]一种高耐受性产酯酵母菌株及其应用

说明书

 

技术领域

    本发明属于生物化工领域，具体涉及一种高耐受性产酯酵母菌株及其应用。

背景技术

产酯酵母，亦称生香酵母，大多属于异型汉逊氏酵母，具有较强的氧化特性和产酯能力，是白酒产香的主要菌种之一。白酒是一种含有丰富香味物质的蒸馏酒，酯类在白酒的香味形成中有特别重要的作用。如何提高白酒中酯类的含量，是白酒生产者普遍关注的问题。

白洒中的酯类，根据其香型的不同，其主要酯的种类和含量都不相同。一般在清香型大曲和川法小曲酒中是乙酸乙酯的含量最多。它是在发酵过程中由酵母菌所产生，其代谢产生途径是在酵母菌细胞内产生。

目前大多数小曲白酒酿造企业普遍出现白酒中乙酸乙酯含量较低，分析其原因有：入池后高发酵力菌株的生长，导致基质中乙醇含量过高，影响乙酸乙酯的生成。因为当基质中乙醇含量超过4%，酯化作用受到抑制；其次可能由于多菌株的生长，导致基质的温度、pH发生变化，影响乙酸乙酯的生成。因此，选育适应性好、高耐受性、高产乙酸乙酯酵母成为解决这一问题的关键点。

发明内容

本发明的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种高耐受性产酯酵母菌株。

本发明的另一目的在于提供上述高耐受性产酯酵母菌株的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

一种高耐受性产酯酵母菌株异常汉逊氏酵母菌BTL-Y01，该菌株保藏于中国典型培养物保藏中心（保藏日期：2013年4月1日，保藏地址：中国.武汉.武汉大学），其分类命名为产酯酵母BTL-Y01 Hansenula anomala BTL-Y01，保藏编号为CCTCC NO：M2013115。

所述的异常汉逊氏酵母菌BTL-Y01来源于一株分离于小曲酒生产用曲的异常汉逊氏酵母菌株（保藏编号为CCTCC NO：M2013115，可以从中国典型培养物保藏中心或湖北工业大学轻工学部酿酒实验室购买），通过耐性（温度、pH和乙醇浓度耐性）驯化后得到。

所述的异常汉逊氏酵母菌BTL-Y01的培养特征为：YEPD固体培养基（酵母膏10g，蛋白胨20g，葡萄糖20g，琼脂20g，加水至1000mL，pH6.0-6.5）32℃培养24h，菌落呈圆形，白色，凸起，边缘光滑，表面干燥有脂质感，菌落易挑取，菌落大小为0.05-0.10cm。

所述的异常汉逊氏酵母菌BTL-Y01于400倍显微镜观察的菌体形态特征为：菌体有圆形或椭圆形，大小为3.66×5.48μm（平均）；美兰染色，大部分（80-90%）细胞不着色，为无色，少部分呈蓝色，可以见着液泡；繁殖方式为一端出芽繁殖。

所述的异常汉逊氏酵母菌BTL-Y01的生物学特征为：其最高耐受温度为38℃，最适生长温度在32℃；耐酸性能好，在pH为1的环境中仍然生长良好，最适生长pH为4；最高耐受酒精浓度为12%（体积浓度）。

所述的异常汉逊氏酵母菌BTL-Y01的稳定性特征为：在YEPD固体培养基32℃培养24h，连续传代10代培养，其培养特征及形态特征均无变化，该菌株的生物学性状稳定。

所述的异常汉逊氏酵母菌BTL-Y01能够以含葡萄糖的培养基作为发酵基质静置培养，可获得酯香味突出，乙酸乙酯含量较高的发酵液；其最佳产酯培养方式为静止培养；产酯最佳培养基为小麦糖化液，小麦糖化液的制备如下：以小麦为原料，将其粉碎后，称取200g，加一定量的水煮沸，糊化10min；待冷却至50-60℃后，加入糖化酶保温糖化1-2小时，然后过滤，补水至1000mL，加葡萄糖将其糖度调节至8度。

上述异常汉逊氏酵母菌BTL-Y01在酿酒中的应用。将所述的高耐受性产酯酵母菌株制成液体种子液或强化曲投入清香型大曲及川法小曲白酒酿造生产；或者单独发酵，将发酵液加入糟醅中一起蒸酒，可提高酒体中乙酸乙酯含量，改善酒质，提高经济效益。

本发明相对于现有技术具有如下优点和效果：

本发明高耐受性异常汉逊氏酵母菌BTL-Y01对温度、pH和酒精浓度的耐受性高，乙酸乙酯产量高；以小麦糖化液作为产酯培养基其产乙酸乙酯量可达到3.903g/L；将其用于酿酒可以提高白酒总酯含量，改善酒质。

具体实施方式

以下实施例用于进一步说明本发明，但不应理解为对本发明的限制。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。

实施例1  高耐受性产酯酵母菌株异常汉逊氏酵母菌BTL-Y01的获得