[发明专利]辣椒轻斑驳病毒反转录-环介导等温扩增检测用引物及其应用无效
| 申请号： | 201310154789.1 | 申请日： | 2013-04-28 |
| 公开（公告）号： | CN103215383A | 公开（公告）日： | 2013-07-24 |
| 发明（设计）人： | 黄天培;廖富荣;关雄;方志鹏;吴媛;郭木金 | 申请（专利权）人： | 福建农林大学 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人： | 蔡学俊 |
| 地址： | 350002 福*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 辣椒 斑驳 病毒 转录 环介导 等温 扩增 检测 引物 及其 应用 | ||
1.一种辣椒轻斑驳病毒RT-LAMP检测引物，由PMMoV-F3、PMMoV-B3、PMMoV-FIP和PMMoV-BIP引物组成，其特征在于核苷酸序列为：
PMMoV-F3：5’- CAGGTGGACTTCGGTCTT -3’
PMMoV-B3：5’- CAAGCTTTGAAAGGTACAGT -3’
PMMoV-FIP ：5’- ATTTCCCCCGATATCATATGTCGTGGAAC
TAGAATACTTGATGATGC -3’
PMMoV-BIP ：5’- GTCGTGACTACGTTCATTGCTGTCAATGC
TATCCTTTTGAGC-3’。
2.一种利用权利要求1检测引物检测辣椒轻斑驳病毒的RT-LAMP方法，其特征在于该方法以样品总RNA为模板，进行RT-LAMP扩增，反应结束后凝胶电泳检测扩增产物，根据是否产生典型的梯状条带判定结果。
3.如权利要求2所述的方法，其反应条件可由两步RT-LAMP法或一步RT-LAMP法进行，其特征在于：
（1）两步RT-LAMP法的反转录反应和LAMP扩增反应两个过程分开进行，反转录反应的温度为42℃，LAMP扩增温度为65 ℃；
（2）一步RT-LAMP法的反转录反应和LAMP扩增反应同时进行，一步RT-LAMP法的反应温度为60 ℃。
4.一种含有权利要求1所述辣椒轻斑驳病毒RT-LAMP检测引物的试剂盒。
5.一种权利要求1所述的引物在辣椒轻斑驳病毒RT-LAMP检测中的应用。
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