[发明专利]人参寡糖组合物及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种人参寡糖组合物及其制备方法和应用，所述人参寡糖组合物具有免疫激活作用。

背景技术

人参是五加科植物人参(Panax ginseng C.A.Meyer)的干燥根，自古以来被认为是医食同补的尚佳药用植物。具有大补元气，固脱生津，安神的作用。大量研究表明人参水提物具有良好的免疫调节活性，能诱导淋巴细胞增殖及T淋巴细胞活性。人参水提物中除含有多糖、皂苷、蛋白质之外，还含有一定量的人参寡糖。

寡糖一般是指由2-10个单糖分子通过糖苷键连接而成的化合物，在生命体内，主要以糖蛋白、糖脂和糖肽等形式参与生命活动，在发挥生物学功能的过程中起决定作用。随着对天然寡糖研究的日益深入，它的独特性也逐渐展现在人们面前。天然寡糖不仅具有抗炎症、抗凝血、促新血管生成、抗病毒、免疫调节等生物活性，而且安全无毒。另外，寡糖具有相对较小的分子量，这将更有利于对其结构的精确测定，同时有利于对寡糖生物活性以及其构效关系的研究。因此，天然寡糖的研究及其在保健食品、医药领域的应用已逐渐成为结构化学、分子生物学、医学和食品学新兴研究领域。

发明内容

本发明的目的在于提供一种具有免疫刺激活性的人参寡糖组合物及其制备方法和应用。

首先，本发明提供一种人参寡糖组合物，该寡糖组合物中所含寡糖的单糖组成为葡萄糖，并且所含寡糖的分子量分布在360-2000的范围内。

并且，在本发明的人参寡糖组合物中包括结构式如下的寡糖，

本发明还提供制备上述人参寡糖组合物的方法，该方法包括下述步骤：

A将人参粉碎，得人参粉末；

B对所述人参粉末进行水提取，然后过滤，得滤液；

C将所述滤液进行离心，取上清液进行冷冻干燥，得干燥粉末；

D向所述干燥粉末中加入95％乙醇，然后离心，得残渣；

E将所述残渣溶于水中，通过透析或膜过滤，得所述人参寡糖组合物。

优选在上述步骤B中，首先将所述人参粉末加入到重量是其8-15倍的水中，浸泡1-2小时，然后在50-70℃下提取60-120分钟。

优选在上述步骤D中，向所述干燥粉末中加入体积是其3-5倍的95％乙醇，浸泡15-30分钟后离心，得到所述残渣，并向得到的所述残渣中加入体积是其3-5倍的95％乙醇，浸泡15-30分钟后离心，重复该操作5-8次，然后在常温下将所述残渣挥干乙醇。

优选在上述步骤E中，所述透析或膜过滤的截留分子量小于等于3000。透析液浓缩、冷冻干燥得人参寡糖组合物。

本发明还提供人参寡糖组合物在制备具有免疫刺激活性的药物中的应用。

所述免疫刺激活性可以为促进淋巴细胞增殖。

所述免疫刺激活性还可以为增强巨噬细胞的吞噬功能，并促进巨噬细胞对一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和活性氧(ROS)的分泌。

本发明提取的人参寡糖组合物能促进淋巴细胞增殖，并对巨噬细胞有激活作用，因此具有免疫激活作用。

具体实施方式

下面基于具体实施例说明本发明的人参寡糖组合物及其制备方法，但本发明并不限于所列举的实施例。

需要说明的是，本发明中使用的仪器为：Aglient RRLC 1200SL液相色谱仪，Applied Biosystems公司的Voyager-DE STR MALDI TOF质谱仪；Thermo的LTQ XL线性离子阱色谱仪；Bruker公司的Vertex 7.0红外光谱仪。

实施例1

称取人参1000克，粉碎至40-60目，用15升蒸馏水浸泡1.5小时后在70℃下提取90分钟。然后用5层纱布过滤。过滤得到的残渣在相同条件下重复提取两次。合并三次提取所得滤液，以4000转/分钟离心10分钟，收集上清液，所得上清液利用旋转蒸发仪在60℃下蒸发至100mL，冷冻干燥，得到干燥粉末(521.3克)。

称取上述干燥粉末100克，向其中加入约500mL的95％乙醇，浸泡20分钟，离心，弃去上清。向离心得到的残渣中再次加入约500mL的95％乙醇，浸泡20分钟，离心，得残渣。将该操作重复8次，然后在常温下挥干乙醇，得干燥残渣。

将上述干燥残渣溶解于蒸馏水中，固液比为1∶5(w/w)。利用截留分子量为3000的膜对溶解液进行透析，透析96小时。收集透析外液，于60℃下减压浓缩，并冷冻干燥，得人参寡糖组合物。