[发明专利]一种用于酿造葡萄醋的酵母菌及其制备方法

权利要求书

1.一种用于酿造葡萄醋的酵母菌，其特征在于所述的酵母菌是毕赤酵母菌，其保藏登记号为：CGMCC No.3076,分类命名为：巴氏毕赤酵母Pichia  pastoris,该菌株于2009年5月22日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。

2.权利要求1所述的用于酿造葡萄醋的酵母菌的制备方法，其特征在于按以下步骤进行：                              

1）菌种的获得：将鲜果发酵得到的新鲜葡萄酒，放入大广口有色玻璃绕环内，上面用纱布盖好，放在通风避光处，待酒面上集结出一层白色薄膜醋膜，从其中优选出纯度高、产酸多的醋酸菌菌种；

2）将上述菌种移到无菌水中稀释至10ˉ⁴～10ˉ⁵ 倍，制备平板分离培养基：葡萄糖10%，蛋白胨 2%，酵母膏1%，琼脂1.5%加入要酿造的葡萄酒至100%；培养基在无菌条件下先加入质量浓度4%酒精，将稀释至10ˉ⁴～10ˉ⁵倍浓度的醋酸菌点滴在培养基上，30℃恒温箱培养，培养后出现醋酸菌菌落，选取单菌落直径最大的，取出再稀释至10ˉ⁴～10ˉ⁵倍，再重复培养三次；

3）将上述2）步骤生长较快的菌种取出用无菌水稀释至10ˉ⁴～10ˉ⁵倍，进行印迹法培养，印迹法培养基组成：葡萄糖10%，蛋白胨2%，酵母膏1%，Caco₃ 2%，琼脂1.5% ，加入要酿造的葡萄酒至100%；将稀释至10ˉ⁴～10ˉ⁵倍浓度的菌种点滴在备制好的印迹法培养基上，将培养基放入30℃恒温箱培养3～5天后，将产酸能力强，并且生长健壮的醋酸菌选出进行第二次的印迹法培养，至3～4次的印迹法培养后，产出稳定的醋酸菌种，即巴氏毕赤酵母（Pichia  pastoris）。