[发明专利]猪繁殖与呼吸综合征病毒通用型实时荧光RT-PCR检测方法和试剂盒有效
| 申请号: | 201110073381.2 | 申请日: | 2011-03-25 | 
| 公开(公告)号: | CN102140551A | 公开(公告)日: | 2011-08-03 | 
| 发明(设计)人: | 田克恭;夏应菊;陈南华;韩雪;訾占超;倪建强;遇秀玲;翟新验 | 申请(专利权)人: | 中国动物疫病预防控制中心 | 
| 主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11;G01N21/64 | 
| 代理公司: | 北京金阙华进专利事务所(普通合伙) 11224 | 代理人: | 吴鸿维 | 
| 地址: | 100026 *** | 国省代码: | 北京;11 | 
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 繁殖 呼吸 综合征 病毒 通用型 实时 荧光 rt pcr 检测 方法 试剂盒 | ||
1.一种能够检测猪繁殖与呼吸综合征通用型的实时荧光RT-PCR方法,其特征包括:
(1)针对PRRSVNsp7基因设计能够检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的特异性引物和探针序列;
(2)采用FAM、VIC、HEX、JOE、NED、TAMRA、CY3、ROX或CY5任意一种荧光素标记猪繁殖与呼吸综合征病毒的探针序列;
(3)将用于检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的引物和探针置于同一个反应管中,使用荧光PCR扩增仪进行实时荧光RT-PCR反应。
2.根据权利要求1所述的用于检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的实时荧光RT-PCR方法,其特征在于所述的特异性引物为:序列为ACTTCCAGATGCAGATTGTG及ACCTCCAGATGCCGTTTGTG的上游引物PRRSV-Eu-F22和PRRSV-Na-F22和序列为TCGTGCTGGGCGGCAAACG及TCGTGTTGGGTGGCAGAAA的下游引物PRRSV-Eu-R22和PRRSV-Na-R22组成。
3.根据权利要求1所述的用于检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的实时荧光RT-PCR方法,其特征在于所述的探针序列为:TACATTYTGGCCCCTGC,其中Y=T/C。
4.一种用于检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的寡核苷酸引物对和探针的组合物。
5.权利要求3中的探针用任意一种荧光素标记,可选自FAM、VIC、HEX、JOE、NED、TAMRA、CY3、ROX或CY5。
6.一种包括权利要求4所述组合物的试剂盒。
7.权利要求6的试剂盒在检测猪繁殖与呼吸综合征中的用途。
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