[发明专利]一种大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭表达载体及其应用

权利要求书

1.一种大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭表达载体，包括如下元件：人工设计的表达调控元件、枯草芽孢杆菌信号肽的编码序列、大肠杆菌的复制起始序列、抗生素抗性基因。

2.根据权利要求1所述的表达载体，其特征在于其DNA序列如以下1)或2)所示；

1)DNA序列为SEQ ID NO：1所示核苷酸序列；

2)与1)限定的DNA序列具有90％以上同源性。

3.根据权利要求1所述的表达载体，其特征在于所述人工设计的表达调控元件由枯草芽孢杆菌P43启动子、枯草芽孢杆菌脱乙酰几丁质酶信号肽的编码序列CSN、F1噬菌体的终止子序列，人工设计的能被枯草芽孢识别的核糖体结合序列序列RSB、人工设计的枯草芽孢杆菌信号肽酶的酶切位点、人工设计的多克隆位点MCS组成。

4.根据权利要求2所述的表达载体，其特征在于所述表达调控元件DNA序列如以下3)或4)或5)所示；

3)其DNA序列为SEQ ID NO.2所示核苷酸序列；

4)在严格条件下与3)限定的DNA序列能够杂交且能促进目的基因转录和翻译的DNA序列；

5)与3)或4)限定的DNA序列具有90％以上同源性，且能促进目的基因转录和翻译的DNA序列。

5.根据权利要求1-4任一所述的表达载体，其特征在于所述抗生素抗性基因为卡那霉素抗性基因和氨苄青霉素抗性基因。

6.根据权利要求1-4任一所述的表达载体，其特征在于所述表达载体的出发载体为pMA5。

7.含有权利要求1-4任一所述表达载体的转基因细胞系。

8.含有权利要求1-4任一所述表达载体的基因工程菌株。

9.权利要求1-4任一所述表达载体在促进在目的基因转录和翻译中的应用。