[发明专利]一种含有免疫球蛋白基因的载体、构建方法及其应用无效
申请号: | 200910080606.X | 申请日: | 2009-03-20 |
公开(公告)号: | CN101509011A | 公开(公告)日: | 2009-08-19 |
发明(设计)人: | 蔡欣;徐东刚;邹民吉;王金凤;王园园 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军军事医学科学院基础医学研究所 |
主分类号: | C12N15/63 | 分类号: | C12N15/63;C12N15/66;C12N1/21;C12P21/02;A61K38/48;A61K47/48;C12R1/19 |
代理公司: | 北京众合诚成知识产权代理有限公司 | 代理人: | 史双元 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 含有 免疫球蛋白 基因 载体 构建 方法 及其 应用 | ||
1、一种含有免疫球蛋白基因的载体,包含编码免疫球蛋白IgG1Fc片段的基因,其特征在于,所述载体的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。
2、根据权利要求1所述的载体,其特征在于,所述编码免疫球蛋白IgG1Fc片段的基因来源于人。
3、一种转化体,其特征在于,所述转化体含有核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的载体。
4、一种含有免疫球蛋白基因的载体的构建方法,其特征在于,由如下操作步骤构成:
(1)根据来源于人的IgG1基因序列,设计并合成针对上述基因序列的引物,以来源于人的基因组或基因组文库为模板,通过PCR方法扩增目的产物;
(2)用T4连接酶将回收后的扩增产物,与pEASY-T载体连接,经转化和筛选阳性克隆后,进行酶切和测序鉴定;
(3)测序正确的连接产物和pBV220载体分别经EcoRI和BamHI双酶切后用T4连接酶连接,经转化和筛选阳性克隆后,进行酶切和测序鉴定,最终获得重组载体。
5、根据权利要求4所述的构建方法,其特征在于,所述的引物为:上游引物如SEQ ID No.2所示,下游引物如SEQ ID No.3所示。
6、根据权利要求4所述的构建方法,其特征在于,所述模板为人胎肝cDNA文库。
7、权利要求1所述的载体在延长重组蛋白药物在体内半衰期方面的应用。
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