[发明专利]液态β－淀粉酶制剂的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及酶制剂的制备方法，具体涉及利用植物制备液态β-淀粉酶制剂的制备方法。 

背景技术

β-淀粉酶(又称α-1，4-D葡聚糖麦芽糖水解酶，E.C.3.2.1.2)是一种外切型淀粉水解酶，它能从淀粉的非还原性末端开始，依次催化水解α-1，4-D葡萄糖苷键，生成麦芽糖。与此同时，发生瓦尔登转位反应(Waldeninversion)，使产物由α-型变为β-型，故称β-淀粉酶。 

由于β-淀粉酶不能水解支链淀粉的α-1，6键，也不能跨过分支点α-1，6键而切开内部的α-1，4键和α-1，6键附近的2～3个α-1，4键，所以在水解产物中残留下侧支外常挂有2～3个葡萄糖残基的β-极限糊精。β-淀粉酶即使作用于直链淀粉时，也只能使淀粉的70％～90％水解成麦芽糖，其它为麦芽三糖和寡糖。β-淀粉酶在工业上是一种重要的酶，它可把淀粉质原料转化成麦芽糖，含量不同的麦芽糖产品可以用于如糖果、啤酒发酵等食品工业，高纯度的麦芽糖液还可替代葡萄糖输液用于糖尿病人。 

在目前已有报道的生产技术中，有用微生物发酵法生产的商品β-淀粉酶，此酶耐热稳定性能差，除产生麦芽糖外，还产生相当量的麦芽三糖，而植物β-淀粉酶耐热稳定性好，作用pH范围广，能产生较多的麦芽糖。但现有从植物中提取的β-淀粉酶都是固体产品，为粗制品杂质含量高，不能作为食品添加剂(见专利公开号CN1225943A大豆β-淀粉酶的制备工艺)，并在制备过程中采用盐析工艺，硫酸钠回收困难，存在废液处理问题。反复冻融使操作复杂，成本高。而专利《提取β-淀粉酶的方法》(见专利公开号CN1491279A)仅提供了采用纤维素酶从大麦或小麦中提取β-淀粉酶，但纤维素酶价格高，生产成本高。到目前为止，由于缺乏有效的制备工艺，高酶活力的液体植物β-淀粉酶制剂仍未实现工业化规模生产。 

发明内容

针对上述现有β-淀粉酶制备方法存在生产成本高、产品杂质含量高以及 废液处理等问题，本申请人提供一种液态β-淀粉酶制剂的制备方法。 

本发明的技术方案如下： 

液态β-淀粉酶制剂的制备方法，其工艺步骤包括： 

以麸皮为原料，其工艺步骤包括麸皮的浸提、固液分离、浸提液的精滤、超滤浓缩、配方、二次精滤、酶活力调整，分述如下： 

浸提： 

(1)配制浸提水：在水中按(重量/体积)加入防腐剂对羟基苯甲酸乙酯0.01～0.03％、山梨酸钾0.1～0.25％、苯甲酸钠0.2～0.5％，还原剂焦亚硫酸钠0.5～1.5％、低亚硫酸钠0.5～1.5％； 

(2)浸提：将麸皮按(重量/体积)1∶4～7加入步骤(1)配制的浸提水；常压下，浸提温度控制在40～55℃，pH控制在4.5～6.5，浸提6～8小时； 

固液分离：浸提后进行固液分离。 

精滤：分离出的浸提液迅速冷到20℃以下，分离出的浸提液加入1～2％(重量/体积)的硅藻土，过精滤板框进行精滤； 

超滤浓缩：所得精滤液进行超滤浓缩，超滤浓缩的温度控制在20℃以下； 

配方：超滤浓缩到所需规格的酶活力要求后，将所得超滤浓缩液放入配方罐，按(重量/体积)加入稳定剂18～22％的氯化钠、8～10％的醋酸钠、5～8％麦芽糊精、0.1～0.25％的山梨酸钾、0.2～0.5％苯甲酸钠，搅拌溶解，混合均匀； 

二次精滤：所得配方液中加入1～2％(重量/体积)的硅藻土，过精滤板框进行精滤。 

酶活力调整：收集二次精滤的滤液，取样作成品检验，用稀释液将二次精滤滤液的酶活力调整到300000U/g或600000U/g。 

所述酶活力调整所用的稀释液是按(重量/体积)加入稳定剂18～22％的氯化钠、8～10％的醋酸钠、5～8％麦芽糊精、0.1～0.25％的山梨酸钾、0.2～0.5％苯甲酸钠的水溶液。 

根据上述制备工艺生产出的300000U/g、600000U/g液态植物β-淀粉酶制剂，产品为棕褐色液体、无异味、可以与水互溶，产品热稳定性好、催化活性强，最适合作用温度在55℃～60℃之间。当温度超过65℃时，反应速度加快，但失活也加快。本品最适合作用pH值范围为5.0～6.8之间。本产品中不含α-淀粉酶。 

本发明所得成品能达到以下指标：酶活力300000U/g、600000U/g，容重：1.15～1.25g/ml，pH5.0～6.0，菌落总数≤10000cfu/ml。活力保存稳定性极高，在25℃以下，保存6个月之后酶活力仍大于90％。