[发明专利]化学发光组合物及其测定土壤有效钼的方法

说明书

(一)技术领域

本发明涉及化学发光技术领域，尤其涉及一种化学发光组合物及利用该体系测定土壤中有效钼的方法。

(二)背景技术

化学发光(Chemiluminescence)是指某些化学反应中发光的现象。其发光机理是：反应体系的某些物质分子吸收了反应释放的能量而由基态跃迁到激发态，然后再从激发态返回基态，同时将能量以光辐射的形式释放出来，产生化学发光。化学发光(Chemiluminescence，CL)分析法是近二十年迅速发展起来的一种新型分析技术，它具有灵敏度高、仪器结构简单、线性范围宽等优点。化学发光法的应用关键在于能够研究开发出实用的高选择性的化学发光体系来检测待测样品各种不同的成分。近年来，在改进和完善原有发光试剂和体系的同时，新发光试剂的合成、新体系的开发、与其它技术的联用(尤其是流动注射技术、传感器技术、HPLC技术及各种固定化试剂技术的联用)，更显示出化学发光分析快速，灵敏，简便等优点，也进一步拓宽了化学发光的应用范围，现在已广泛应用于矿物岩石分析、材料分析、环境保护监测、药物分析和临床分析等方面。化学发光反应所以能够用于分析测定，是因为化学发光强度与化学发光速率相关联，因而一切影响反应速率的因素都可以作为建立测定方法的依据。化学发光分析测定的物质可以分为三类：第一类物质是化学发光反应的反应物；第二类物质是化学发光反应中的催化剂、增敏剂或者抑制剂等；第三类物质是耦合反应中的反应物、催化剂、增敏剂或者抑制剂等。通过标记方式 利用这三类物质还可以测定人们感兴趣的其他物质，进一步扩大化学发光分析的应用范围。目前，开发简单、经济、高发光率的新发光试剂仍是研究方向。为了解决化学发光分析技术选择性差的问题，研究选择性高的化学发光体系和高效的分离手段将是化学分析工作者的主要任务，也是化学发光分析技术能否广泛应用的关键问题。

钼是作物必需的微量元素，而土壤中的钼是植物获得钼的主要途径。钼通常以MoO₄^2-的形式存在于自然界中，其在土壤中的含量非常低，一般在1.0mg/kg以下，因此用常规方法测定土壤中的钼是比较困难的。目前，比较常用的土壤有效钼测定方法有分光光度法、极谱法等。分光光度法灵敏度较低，检测限高，但其不适用于含钼量很低的土壤样品；极谱法要用到滴汞电极或悬汞电极，这种方法对操作者和环境有不良影响。当前，关于微量钼的化学发光测定体系尚未见报道。

(三)发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种灵敏度高、检测线低、对环境和操作人员无害的化学发光体系，并进一步给出了利用该体系快速准确的测定土壤中有效钼的方法。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：

钼酸根在酸性条件下被硼氢化钾还原为低价态的钼后，再与SCN^-相结合生成络合物，该络合物与鲁米诺相遇即发生化学发光反应，在一定的浓度条件下，其发光强度与参加反应的物质的浓度成正相关。检测该反应的化学发光强度，便可计算出待测物质的浓度。例如，在硼氢化钾、SCN^-、鲁米诺过量的条件下，可准确计算出钼酸根的含量；在硼氢化钾、钼酸根、鲁米诺过量的条件下，可 准确计算出SCN^-的含量。

一种化学发光组合物，它是A、B两种组合物以1∶1～3的体积比混合后而呈现化学发光的体系，组合物A为溶解有SCN^-40～2000mg/kg、硼氢化钾30～300mg/kg、MoO₄^2-0.01～10mg/kg，pH值为0.10～2.00的溶液，组合物B为溶解有鲁米诺1.0×10^-5～1.0×10^-3mol/L，pH值为9.00～14.00的溶液。

所述组合物A中溶解有SCN^-800～1800mg/kg、硼氢化钾40～200mg/kg、MoO₄^2-0.02～5mg/kg，其pH值为0.50～1.5。

所述组合物B中溶解有鲁米诺8.0×10^-5～8.0×10^-4mol/L，其pH值为10.00～13.00的溶液。