[发明专利]核酸配基组芯片及其制备方法

权利要求书

1.一种核酸配基组芯片，其特征在于：是将靶物质特异性寡核苷酸配基组集成固定在载体上制成配基组芯片；其中靶物质特异性的寡核苷酸配基组是由SELEX技术筛选获得的靶物质特异性的寡核苷酸捕捉配基组；所述寡核苷酸捕捉配基的一端带有可连接固化配基的活化基团，该活化基团通过包被在载体上的链霉亲和素固定在载体上。

2.如权利要求1所述核酸配基组芯片，其特征在于：所述靶物质特异性的寡核苷酸捕捉配基为一段20-40个碱基的寡核苷酸片段，其一端带有生物素，并通过链霉亲和素固定在载体上；另一端形成捕捉配体的配基结构。

3.如权利要求1所述核酸配基组芯片，其特征在于：所述特异寡核苷酸捕捉配基为能与配体直接结合的单链DNA或RNA。

4.如权利要求1所述核酸配基组芯片，其特征在于：所述载体为硝酸纤维素滤膜、玻片或磁球。

5.一种核酸配基组芯片的制备方法，是由以下工艺步骤完成：

①利用SELEX技术筛选相关配体的特异性寡核苷酸配基；

②在载体上包被链霉亲和素，用封闭液封闭；

③将载体与末端带有生物素的不同种类和数量的配基在37℃下共同孵育30分钟，然后用洗涤液洗涤三次，3min/次，即制备成核酸配基组芯片。

6.如权利要求1所述核酸配基组芯片的制备方法，其特征在于：步骤①所述的封闭液为含5％牛血清白蛋白或奶粉PBS封闭液。

7.如权利要求1所述核酸配基组芯片的制备方法，其特征在于：步骤③所述的洗涤液为含0.5％Tween-20的SHCMK(PH 7.35)结合液。

8.如权利要求1所述核酸配基组芯片的制备方法，其特征在于：所述载体为硝酸纤维素滤膜、玻片或磁球。

9.一种利用核酸配基组芯片检测配体的方法，是由以下工艺步骤完成：

①制备检测配体：将检测液与配基芯片在37℃下共同孵育30分钟，用洗涤液洗涤三次，3min/次；然后用洗脱缓冲溶液洗脱下配体，即制备出配体混合液。

②检测：将采集制备的配体混合液用特异序列质谱分析鉴定；或采用信标配基PCR扩增进行检测；或采用激光解析蛋白图谱进行分析。

10.如权利要求9所述利用核酸配基组芯片检测配体的方法，其特征在于：步骤①所述的洗涤液为SHCMK(PH 7.35)+0.05％Tween 20；所述洗脱缓冲溶液为SHCMK(PH 7.35)+0.5％Tween 20。