本发明公开了基于CRISPR/Cas12a方法检测志贺氏菌的试剂盒及其使用方法,本发明所述的试剂盒包括CRISPR/Cas12a引物、crRNA或crRNA制备试剂、核酸扩增试剂、探针和Cas12a酶;所述CRISPR/Cas12a引物包括如SEQ ID NO.1所示序列的CRISPR/Cas12a上游引物,如SEQ ID NO.2所示序列的CRISPR/Cas12a下游引物。
本发明公开了密码子优化的Cas12i3蛋白编码基因及其应用。具体地公开了DNA分子,所述DNA分子的核苷酸序列为SEQ ID No.3。本发明还公开了含有所述DNA分子的基因编辑系统,以及提高Cas12i3蛋白介导的基因编辑的效率的方法。本发明为了更好的将Cas12i3蛋白应用于哺乳动物基因编辑,设计了不同密码子优化方案,通过软件评估和实验验证,比较筛选出Cas12i3表达量和编辑效果好的密码子优化方案。本发明筛选到在哺乳动物中高效表达Cas12i3蛋白的密码子优化方案,可以极大地提高Cas12i3蛋白的编辑效率,为Cas12i3蛋白在哺乳动物中的广泛应用奠定了基础,有较大的实际应用价值。