本发明公开了一种酶活提高的γ‑谷氨酰转肽酶突变体及其构建方法,属于基因工程领域。本发明的突变体是在SEQ ID N0.2所示的氨基酸的基础上,将第413位氨基酸由苏氨酸突变成半胱氨酸。本发明得到的突变体在枯草芽孢杆菌中表达,γ‑谷氨酰转肽酶突变体酶的转肽反应活力较突变前提高12%,水解反应活力降低了50%。本发明表明413位氨基酸残基对γ‑谷氨酰转肽酶的转肽反应活力有较大影响,对该酶的催化机理的研究提供了一定的基础,并提高了该酶的工业应用潜力。本发明所得的γ‑谷氨酰转肽酶突变体可用于制备L‑茶氨酸。
本发明公开了一种二肽酶突变体及其编码基因和应用。本发明以一种具有水解有机磷化合物混杂活性的海洋细菌二肽酶OPAA4301(其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示)为蛋白质工程改造起点,运用定点饱和突变和组合突变技术改造其底物结合位点,获得有机磷化合物水解活性提高的二肽酶突变体本发明的二肽酶突变体可高效水解对氧磷等常见有机磷化合物污染物,在有机污染修复领域具有良好应用前景。